中国公共卫生
中國公共衛生
중국공공위생
CHINA PUBLIC HEALTH
2004年
9期
1052-1053
,共2页
周赞虎%刘仁海%章军%徐虹%周克夫
週讚虎%劉仁海%章軍%徐虹%週剋伕
주찬호%류인해%장군%서홍%주극부
hCu,Zn-SOD%定点突变%表达%大肠埃希菌
hCu,Zn-SOD%定點突變%錶達%大腸埃希菌
hCu,Zn-SOD%정점돌변%표체%대장애희균
目的在克隆人源铜锌超氧化物歧化酶基因(hCu,Zn-SOD)的基础上,对hCu,Zn-SOD进行定点突变,使其在E.coliDH5α中表达,为进一步改造hCu,Zn-SOD基因奠定基础.方法首先构建质粒pESOD,然后用定点突变技术把其中hCu,Zn-SOD的Cys111密码子突变为Ala111密码子,再与pUCMT1相连接,构建表达载体pE-SODT111,使其在E.coliDH5α中表达,表达产物用改良的邻苯三酚法和Westem杂交测定.结果hCu,Zn-SOD突变后在E.coliDH5α中成功表达,表达产物具有SOD活性,活力为16.447 U/ml培养液.结论hCu,Zn-SOD基因经过定点突变后构建的表达载体可在DH5n中表达,表达产物同样具有天然的hCu,Zn-SOD活性.
目的在剋隆人源銅鋅超氧化物歧化酶基因(hCu,Zn-SOD)的基礎上,對hCu,Zn-SOD進行定點突變,使其在E.coliDH5α中錶達,為進一步改造hCu,Zn-SOD基因奠定基礎.方法首先構建質粒pESOD,然後用定點突變技術把其中hCu,Zn-SOD的Cys111密碼子突變為Ala111密碼子,再與pUCMT1相連接,構建錶達載體pE-SODT111,使其在E.coliDH5α中錶達,錶達產物用改良的鄰苯三酚法和Westem雜交測定.結果hCu,Zn-SOD突變後在E.coliDH5α中成功錶達,錶達產物具有SOD活性,活力為16.447 U/ml培養液.結論hCu,Zn-SOD基因經過定點突變後構建的錶達載體可在DH5n中錶達,錶達產物同樣具有天然的hCu,Zn-SOD活性.
목적재극륭인원동자초양화물기화매기인(hCu,Zn-SOD)적기출상,대hCu,Zn-SOD진행정점돌변,사기재E.coliDH5α중표체,위진일보개조hCu,Zn-SOD기인전정기출.방법수선구건질립pESOD,연후용정점돌변기술파기중hCu,Zn-SOD적Cys111밀마자돌변위Ala111밀마자,재여pUCMT1상련접,구건표체재체pE-SODT111,사기재E.coliDH5α중표체,표체산물용개량적린분삼분법화Westem잡교측정.결과hCu,Zn-SOD돌변후재E.coliDH5α중성공표체,표체산물구유SOD활성,활력위16.447 U/ml배양액.결론hCu,Zn-SOD기인경과정점돌변후구건적표체재체가재DH5n중표체,표체산물동양구유천연적hCu,Zn-SOD활성.
