南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
9期
1523-1529
,共7页
宫玉波%陆晓和%柯晓云%周瑾%袁伟%汤明芳%罗晓阳%崔国华
宮玉波%陸曉和%柯曉雲%週瑾%袁偉%湯明芳%囉曉暘%崔國華
궁옥파%륙효화%가효운%주근%원위%탕명방%라효양%최국화
CD25单克隆抗体%细胞因子%角膜移植
CD25單剋隆抗體%細胞因子%角膜移植
CD25단극륭항체%세포인자%각막이식
目的 研究CD25单克隆抗体对大鼠角膜的毒性以及对同种异体大鼠角膜移植后房水中细胞因子的影响.探讨其对大鼠角膜移植免疫排斥反应的防治效果.方法 ①将12只SD大鼠随机分为生理盐水对照组、50μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、100μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、200μg CD25单克隆抗体结膜下注射组,每组3只.各组大鼠均右眼用药.分别于0、2、4、6、8d结膜下注射生理盐水及不同剂量的CD25单克隆抗体,共5次.每日行裂隙灯显微镜检查.观察角膜有无水肿、混浊发生.并于第9天取右眼角膜行病理及透射电镜观察角膜各层的变化.②以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体建立角膜移植实验模型.将93只SD大鼠随机分为五组,A组:正常组;B组:角膜移植对照组;C组:CD25单克隆抗体治疗组;D组:CD25单克隆抗体联合地塞米松治疗组;E组:地塞米松治疗组.B组术后给予生理盐水;C组术后给予CD25单克隆抗体100 μg;D组术后给予CD25单克隆抗体100μg联合地塞米松50 μg治疗;E组术后给予地塞米松100μg;各共用5次,分别于术后0、2、4、6、8 d经球结膜下注射给药.用裂隙灯观察移植排斥情况.利用逆转录-多聚酶链反应检测植片内IFN-γmRNA的表达,酶联免疫吸附法检测房水中IFN-γ和IL-4的浓度.结果 ①50μgCD25单克隆抗体和100μgCD25单克隆抗体对角膜基本无影响;200μg的CD25单克隆抗体组透射电镜检查发现角膜基质细胞及内皮细胞有不同程度的肿胀.②C、D、E组发生排斥反应时间分别为(13.167±1.169),(17.333±2.160),(16.417±1.379)d较B组发生排斥反应时间(10.583±1.084)a明显延迟,差异有统计学意义(p＜0.05).正常角膜无IFN-γmRNA的表达,术后11天.B组移植角膜植片内IFN-γmRNA的表达较C、D、E组明显增强(p＜0.05).C、D、E组术后6 d及11 d房水巧N叫的含量明显低于同期的B组(p＜0.05);同C组相比,术后11d D、E组房水IFN-γ的含量明显降低(P＜0.05).术后6 d和11 d,与B组相比,同期C组IL-4含量明显升高(P＜0.05),而同期D、E组IL-4含量明显降低(P＜0.05);术后6 d和11 d,与C组相比,同期D、E组IL-4含量明显降低(P＜0.05).结论 50μg CD25单克隆抗体和100 μgCD25单克隆抗体对角膜基本无影响.IFN-γ和IL-4在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用.CD25单克隆抗体通过抑制Th1因子(IFN-γ)、促进Th2因子(IL-4)表达降低角膜移植免疫排斥反应的发生率,从而延长角膜植片存活时间;而CD25单克隆抗体联合地塞米松治疗通过同时抑制Th1因子(IFN-γ)、Th2因子(IL-4)表达,却更能延长角膜植片的存活时间,具有重要的临床应用价值.
目的 研究CD25單剋隆抗體對大鼠角膜的毒性以及對同種異體大鼠角膜移植後房水中細胞因子的影響.探討其對大鼠角膜移植免疫排斥反應的防治效果.方法 ①將12隻SD大鼠隨機分為生理鹽水對照組、50μg CD25單剋隆抗體結膜下註射組、100μg CD25單剋隆抗體結膜下註射組、200μg CD25單剋隆抗體結膜下註射組,每組3隻.各組大鼠均右眼用藥.分彆于0、2、4、6、8d結膜下註射生理鹽水及不同劑量的CD25單剋隆抗體,共5次.每日行裂隙燈顯微鏡檢查.觀察角膜有無水腫、混濁髮生.併于第9天取右眼角膜行病理及透射電鏡觀察角膜各層的變化.②以Wistar大鼠為供體,SD大鼠為受體建立角膜移植實驗模型.將93隻SD大鼠隨機分為五組,A組:正常組;B組:角膜移植對照組;C組:CD25單剋隆抗體治療組;D組:CD25單剋隆抗體聯閤地塞米鬆治療組;E組:地塞米鬆治療組.B組術後給予生理鹽水;C組術後給予CD25單剋隆抗體100 μg;D組術後給予CD25單剋隆抗體100μg聯閤地塞米鬆50 μg治療;E組術後給予地塞米鬆100μg;各共用5次,分彆于術後0、2、4、6、8 d經毬結膜下註射給藥.用裂隙燈觀察移植排斥情況.利用逆轉錄-多聚酶鏈反應檢測植片內IFN-γmRNA的錶達,酶聯免疫吸附法檢測房水中IFN-γ和IL-4的濃度.結果 ①50μgCD25單剋隆抗體和100μgCD25單剋隆抗體對角膜基本無影響;200μg的CD25單剋隆抗體組透射電鏡檢查髮現角膜基質細胞及內皮細胞有不同程度的腫脹.②C、D、E組髮生排斥反應時間分彆為(13.167±1.169),(17.333±2.160),(16.417±1.379)d較B組髮生排斥反應時間(10.583±1.084)a明顯延遲,差異有統計學意義(p＜0.05).正常角膜無IFN-γmRNA的錶達,術後11天.B組移植角膜植片內IFN-γmRNA的錶達較C、D、E組明顯增彊(p＜0.05).C、D、E組術後6 d及11 d房水巧N叫的含量明顯低于同期的B組(p＜0.05);同C組相比,術後11d D、E組房水IFN-γ的含量明顯降低(P＜0.05).術後6 d和11 d,與B組相比,同期C組IL-4含量明顯升高(P＜0.05),而同期D、E組IL-4含量明顯降低(P＜0.05);術後6 d和11 d,與C組相比,同期D、E組IL-4含量明顯降低(P＜0.05).結論 50μg CD25單剋隆抗體和100 μgCD25單剋隆抗體對角膜基本無影響.IFN-γ和IL-4在角膜移植免疫排斥反應過程中髮揮重要的作用.CD25單剋隆抗體通過抑製Th1因子(IFN-γ)、促進Th2因子(IL-4)錶達降低角膜移植免疫排斥反應的髮生率,從而延長角膜植片存活時間;而CD25單剋隆抗體聯閤地塞米鬆治療通過同時抑製Th1因子(IFN-γ)、Th2因子(IL-4)錶達,卻更能延長角膜植片的存活時間,具有重要的臨床應用價值.
목적 연구CD25단극륭항체대대서각막적독성이급대동충이체대서각막이식후방수중세포인자적영향.탐토기대대서각막이식면역배척반응적방치효과.방법 ①장12지SD대서수궤분위생리염수대조조、50μg CD25단극륭항체결막하주사조、100μg CD25단극륭항체결막하주사조、200μg CD25단극륭항체결막하주사조,매조3지.각조대서균우안용약.분별우0、2、4、6、8d결막하주사생리염수급불동제량적CD25단극륭항체,공5차.매일행렬극등현미경검사.관찰각막유무수종、혼탁발생.병우제9천취우안각막행병리급투사전경관찰각막각층적변화.②이Wistar대서위공체,SD대서위수체건립각막이식실험모형.장93지SD대서수궤분위오조,A조:정상조;B조:각막이식대조조;C조:CD25단극륭항체치료조;D조:CD25단극륭항체연합지새미송치료조;E조:지새미송치료조.B조술후급여생리염수;C조술후급여CD25단극륭항체100 μg;D조술후급여CD25단극륭항체100μg연합지새미송50 μg치료;E조술후급여지새미송100μg;각공용5차,분별우술후0、2、4、6、8 d경구결막하주사급약.용렬극등관찰이식배척정황.이용역전록-다취매련반응검측식편내IFN-γmRNA적표체,매련면역흡부법검측방수중IFN-γ화IL-4적농도.결과 ①50μgCD25단극륭항체화100μgCD25단극륭항체대각막기본무영향;200μg적CD25단극륭항체조투사전경검사발현각막기질세포급내피세포유불동정도적종창.②C、D、E조발생배척반응시간분별위(13.167±1.169),(17.333±2.160),(16.417±1.379)d교B조발생배척반응시간(10.583±1.084)a명현연지,차이유통계학의의(p＜0.05).정상각막무IFN-γmRNA적표체,술후11천.B조이식각막식편내IFN-γmRNA적표체교C、D、E조명현증강(p＜0.05).C、D、E조술후6 d급11 d방수교N규적함량명현저우동기적B조(p＜0.05);동C조상비,술후11d D、E조방수IFN-γ적함량명현강저(P＜0.05).술후6 d화11 d,여B조상비,동기C조IL-4함량명현승고(P＜0.05),이동기D、E조IL-4함량명현강저(P＜0.05);술후6 d화11 d,여C조상비,동기D、E조IL-4함량명현강저(P＜0.05).결론 50μg CD25단극륭항체화100 μgCD25단극륭항체대각막기본무영향.IFN-γ화IL-4재각막이식면역배척반응과정중발휘중요적작용.CD25단극륭항체통과억제Th1인자(IFN-γ)、촉진Th2인자(IL-4)표체강저각막이식면역배척반응적발생솔,종이연장각막식편존활시간;이CD25단극륭항체연합지새미송치료통과동시억제Th1인자(IFN-γ)、Th2인자(IL-4)표체,각경능연장각막식편적존활시간,구유중요적림상응용개치.
