医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2008年
6期
488-492
,共5页
卢忠燕%甘立霞%王喆%缪洪明%邹全明
盧忠燕%甘立霞%王喆%繆洪明%鄒全明
로충연%감립하%왕철%무홍명%추전명
肝癌细胞系%小干扰RNA%HepG2细胞%增殖
肝癌細胞繫%小榦擾RNA%HepG2細胞%增殖
간암세포계%소간우RNA%HepG2세포%증식
目的 利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制肝癌细胞系中FoxO1基因的表达,观察其受抑制后对细胞增殖能力的影响.方法 设计针对FoxO1基因的siRNA,构建于腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,转染包装细胞293细胞,获得含Ad-siRNA-FoxO1的重组腺病毒.体外感染人肝癌细胞系HepG2,Western印迹检测Ad-siRNA-FoxO1对FoxO1蛋白的抑制效率.与PEPCK.luc共转染HepG2细胞,检测FoxO1表达水平对PEPCK启动子活性的影响,并观察FoxO1表达水平的改变对肝癌细胞系增殖的影响.结果 成功构建3个针对FoxO1的siR-NA重组腺病毒载体,重组腺病毒均能显著抑制HepG2细胞中FoxO1蛋白的表达,并抑制PEPCK启动子的活性和显著促进细胞增殖.结论 肝癌细胞系中FoxO1参与了细胞增殖的调节.
目的 利用小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)抑製肝癌細胞繫中FoxO1基因的錶達,觀察其受抑製後對細胞增殖能力的影響.方法 設計針對FoxO1基因的siRNA,構建于腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV中,與腺病毒骨架質粒pAdeasy-1在BJ5183細菌中進行同源重組,轉染包裝細胞293細胞,穫得含Ad-siRNA-FoxO1的重組腺病毒.體外感染人肝癌細胞繫HepG2,Western印跡檢測Ad-siRNA-FoxO1對FoxO1蛋白的抑製效率.與PEPCK.luc共轉染HepG2細胞,檢測FoxO1錶達水平對PEPCK啟動子活性的影響,併觀察FoxO1錶達水平的改變對肝癌細胞繫增殖的影響.結果 成功構建3箇針對FoxO1的siR-NA重組腺病毒載體,重組腺病毒均能顯著抑製HepG2細胞中FoxO1蛋白的錶達,併抑製PEPCK啟動子的活性和顯著促進細胞增殖.結論 肝癌細胞繫中FoxO1參與瞭細胞增殖的調節.
목적 이용소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)억제간암세포계중FoxO1기인적표체,관찰기수억제후대세포증식능력적영향.방법 설계침대FoxO1기인적siRNA,구건우선병독천사재체pAdTrack-CMV중,여선병독골가질립pAdeasy-1재BJ5183세균중진행동원중조,전염포장세포293세포,획득함Ad-siRNA-FoxO1적중조선병독.체외감염인간암세포계HepG2,Western인적검측Ad-siRNA-FoxO1대FoxO1단백적억제효솔.여PEPCK.luc공전염HepG2세포,검측FoxO1표체수평대PEPCK계동자활성적영향,병관찰FoxO1표체수평적개변대간암세포계증식적영향.결과 성공구건3개침대FoxO1적siR-NA중조선병독재체,중조선병독균능현저억제HepG2세포중FoxO1단백적표체,병억제PEPCK계동자적활성화현저촉진세포증식.결론 간암세포계중FoxO1삼여료세포증식적조절.
