四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
1期
29-32
,共4页
汪川%刘衡川%裴晓方%余倩%张朝武
汪川%劉衡川%裴曉方%餘倩%張朝武
왕천%류형천%배효방%여천%장조무
β-半乳糖苷酶%乳酸乳球菌%乳糖不耐受%蛋白表达%蛋白分泌
β-半乳糖苷酶%乳痠乳毬菌%乳糖不耐受%蛋白錶達%蛋白分泌
β-반유당감매%유산유구균%유당불내수%단백표체%단백분비
目的 构建能非融合表达高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,并对其酶活性和分泌性能进行研究.方法 提取能在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶的重组质粒pMG36e-lacZ 1.1480和pMG36e-lacZ wch9901,电转化乳酸乳球菌乳酸亚种MGl363.测定重组菌在不同培养时间和乳糖浓度下的β-半乳糖苷酶活性,及在不同培养条件下的酶分泌率.结果 携带pMG36e-lacZ wch9901的重组乳酸乳球菌(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)具最高酶活性,其β-半乳糖苷酶活性达(16.95±0.09)U/mg pro,为基因初始菌的2.75倍;重组乳酸乳球菌培养24 h产酶达高峰;培养基含乳糖时,重组菌酶活测定结果表现为降低;重组乳酸乳球菌表达的β-半乳糖苷酶可分泌到培养基中,当培养基不含红霉素,而含20 g/L乳糖时,分泌率最高,达(27.09±0.05)%.结论 获得了能非融合表达和分泌高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,可在此基础上进一步研制β-半乳糖苷酶活菌释放体.
目的 構建能非融閤錶達高活性β-半乳糖苷酶的重組乳痠乳毬菌,併對其酶活性和分泌性能進行研究.方法 提取能在大腸桿菌中非融閤錶達德氏乳桿菌保加利亞亞種β-半乳糖苷酶的重組質粒pMG36e-lacZ 1.1480和pMG36e-lacZ wch9901,電轉化乳痠乳毬菌乳痠亞種MGl363.測定重組菌在不同培養時間和乳糖濃度下的β-半乳糖苷酶活性,及在不同培養條件下的酶分泌率.結果 攜帶pMG36e-lacZ wch9901的重組乳痠乳毬菌(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)具最高酶活性,其β-半乳糖苷酶活性達(16.95±0.09)U/mg pro,為基因初始菌的2.75倍;重組乳痠乳毬菌培養24 h產酶達高峰;培養基含乳糖時,重組菌酶活測定結果錶現為降低;重組乳痠乳毬菌錶達的β-半乳糖苷酶可分泌到培養基中,噹培養基不含紅黴素,而含20 g/L乳糖時,分泌率最高,達(27.09±0.05)%.結論 穫得瞭能非融閤錶達和分泌高活性β-半乳糖苷酶的重組乳痠乳毬菌,可在此基礎上進一步研製β-半乳糖苷酶活菌釋放體.
목적 구건능비융합표체고활성β-반유당감매적중조유산유구균,병대기매활성화분비성능진행연구.방법 제취능재대장간균중비융합표체덕씨유간균보가리아아충β-반유당감매적중조질립pMG36e-lacZ 1.1480화pMG36e-lacZ wch9901,전전화유산유구균유산아충MGl363.측정중조균재불동배양시간화유당농도하적β-반유당감매활성,급재불동배양조건하적매분비솔.결과 휴대pMG36e-lacZ wch9901적중조유산유구균(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)구최고매활성,기β-반유당감매활성체(16.95±0.09)U/mg pro,위기인초시균적2.75배;중조유산유구균배양24 h산매체고봉;배양기함유당시,중조균매활측정결과표현위강저;중조유산유구균표체적β-반유당감매가분비도배양기중,당배양기불함홍매소,이함20 g/L유당시,분비솔최고,체(27.09±0.05)%.결론 획득료능비융합표체화분비고활성β-반유당감매적중조유산유구균,가재차기출상진일보연제β-반유당감매활균석방체.
