动物学杂志
動物學雜誌
동물학잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOOLOGY
2009年
4期
70-77
,共8页
马驰%刘淑清%宗军卫%袁章利%孙明忠%吴玉群%李建立%孙立新%郑庆印
馬馳%劉淑清%宗軍衛%袁章利%孫明忠%吳玉群%李建立%孫立新%鄭慶印
마치%류숙청%종군위%원장리%손명충%오옥군%리건립%손립신%정경인
蛇岛蝮%蛇毒%双向电泳%高效液相色谱%电喷雾质谱
蛇島蝮%蛇毒%雙嚮電泳%高效液相色譜%電噴霧質譜
사도복%사독%쌍향전영%고효액상색보%전분무질보
采用荧光染料(Cy5)标记中国辽宁蛇岛蝮(Gloydius shedaoensis shedaoensis,GSS)蛇毒(snake venom,SV,GSS-SV)蛋白质,获得了该蛇毒的双向十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D SDS-PAGE)图谱,经DeCyder软件分析,分辨出1 000多个蛋白点,分子量范围在10～150 之间,等电点在4～7的蛋白质点占78.8%.凝胶后染色(post-staining)采用蛋白荧光染料Deep Purple,选取的5个蛋白点经胶内酶解,产生的肽段经高效液相色谱-电喷雾串联质谱(high performance liquid ehromatography/HPLC-electro-spray ionization tandem mass spectrometry/ESI-MS/MS,HPLC-ESI-MS/MS)进行序列测定,质谱数据经Sequest Bioworks软件分析,为蛇毒L-氨基酸氧化酶、金属蛋白酶、类凝血酶、纤溶酶原激活物和磷脂酶A2的同源蛋白.本研究采用的荧光标记2D SDS-PAGE结合HPLC-ESI-MS/MS的技术适于高通量研究蛇毒蛋白组成.
採用熒光染料(Cy5)標記中國遼寧蛇島蝮(Gloydius shedaoensis shedaoensis,GSS)蛇毒(snake venom,SV,GSS-SV)蛋白質,穫得瞭該蛇毒的雙嚮十二烷基硫痠鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(2D SDS-PAGE)圖譜,經DeCyder軟件分析,分辨齣1 000多箇蛋白點,分子量範圍在10～150 之間,等電點在4～7的蛋白質點佔78.8%.凝膠後染色(post-staining)採用蛋白熒光染料Deep Purple,選取的5箇蛋白點經膠內酶解,產生的肽段經高效液相色譜-電噴霧串聯質譜(high performance liquid ehromatography/HPLC-electro-spray ionization tandem mass spectrometry/ESI-MS/MS,HPLC-ESI-MS/MS)進行序列測定,質譜數據經Sequest Bioworks軟件分析,為蛇毒L-氨基痠氧化酶、金屬蛋白酶、類凝血酶、纖溶酶原激活物和燐脂酶A2的同源蛋白.本研究採用的熒光標記2D SDS-PAGE結閤HPLC-ESI-MS/MS的技術適于高通量研究蛇毒蛋白組成.
채용형광염료(Cy5)표기중국료녕사도복(Gloydius shedaoensis shedaoensis,GSS)사독(snake venom,SV,GSS-SV)단백질,획득료해사독적쌍향십이완기류산납취병희선알응효전영(2D SDS-PAGE)도보,경DeCyder연건분석,분변출1 000다개단백점,분자량범위재10～150 지간,등전점재4～7적단백질점점78.8%.응효후염색(post-staining)채용단백형광염료Deep Purple,선취적5개단백점경효내매해,산생적태단경고효액상색보-전분무천련질보(high performance liquid ehromatography/HPLC-electro-spray ionization tandem mass spectrometry/ESI-MS/MS,HPLC-ESI-MS/MS)진행서렬측정,질보수거경Sequest Bioworks연건분석,위사독L-안기산양화매、금속단백매、류응혈매、섬용매원격활물화린지매A2적동원단백.본연구채용적형광표기2D SDS-PAGE결합HPLC-ESI-MS/MS적기술괄우고통량연구사독단백조성.
