生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2009年
4期
1-4
,共4页
BjαIT%抗血清%scFv
BjαIT%抗血清%scFv
BjαIT%항혈청%scFv
根据成熟昆虫神经毒素BjαIT的氨基酸序列,人工合成毒素基因,并克隆至大肠杆菌表达栽体pPET-30a(+).在IPTG的诱导下,神经毒素在大肠杆菌中融合表达,表达产物经镍亲和层析纯化,纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了特异性较高的抗血清,抗体滴度迭1:512,000.提取免疫小鼠脾细胞总RNA,通过RT-PCR分别扩增重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因片段,在连接肽linker的连接下成功构建了包含抗BjαIT的全长scFv基因库.本研究为新型蝎昆虫神经毒素BjαIT的检测奠定了基础.
根據成熟昆蟲神經毒素BjαIT的氨基痠序列,人工閤成毒素基因,併剋隆至大腸桿菌錶達栽體pPET-30a(+).在IPTG的誘導下,神經毒素在大腸桿菌中融閤錶達,錶達產物經鎳親和層析純化,純化蛋白免疫BALB/c小鼠,製備瞭特異性較高的抗血清,抗體滴度迭1:512,000.提取免疫小鼠脾細胞總RNA,通過RT-PCR分彆擴增重鏈可變區(VH)及輕鏈可變區(VL)基因片段,在連接肽linker的連接下成功構建瞭包含抗BjαIT的全長scFv基因庫.本研究為新型蝎昆蟲神經毒素BjαIT的檢測奠定瞭基礎.
근거성숙곤충신경독소BjαIT적안기산서렬,인공합성독소기인,병극륭지대장간균표체재체pPET-30a(+).재IPTG적유도하,신경독소재대장간균중융합표체,표체산물경얼친화층석순화,순화단백면역BALB/c소서,제비료특이성교고적항혈청,항체적도질1:512,000.제취면역소서비세포총RNA,통과RT-PCR분별확증중련가변구(VH)급경련가변구(VL)기인편단,재련접태linker적련접하성공구건료포함항BjαIT적전장scFv기인고.본연구위신형갈곤충신경독소BjαIT적검측전정료기출.
