中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
20期
3615-3619
,共5页
丁然%游洪波%李锋%孙凯
丁然%遊洪波%李鋒%孫凱
정연%유홍파%리봉%손개
前软骨干细胞%种子细胞%ihh-PTHrP信号通路%软骨组织工程%脉冲磁场
前軟骨榦細胞%種子細胞%ihh-PTHrP信號通路%軟骨組織工程%脈遲磁場
전연골간세포%충자세포%ihh-PTHrP신호통로%연골조직공정%맥충자장
背景:前期研究证实脉冲电磁场对前软骨干细胞增殖具有促进作用,但其作用机制不明确.目的:进一步探讨脉冲电磁场对前软骨干细胞增殖分化的影响,并观察其对前软骨干细胞Ihh/PTHrP信号通路活性的影响.方法:采用免疫磁珠分选法获取并纯化SD大鼠前软骨干细胞,使用频率为50 MHz,电场强度为1 mT的脉冲电磁场进行干预,0.5 h,次,2次/d,干预2,4,6 d后收集细胞,以不给予磁场刺激的为空白对照.通过RT-PCR法检测细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的基因表达水平,再通过Western-blot法测定各组细胞印度刺猬蛋白、甲状旁腺激素相关肽蛋白的表达水平.结果与结论:RT.PCR结果显示,Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达随磁场刺激时间延长而增高,且经磁场刺激前软骨干细胞的聚集蛋白聚糖明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.01). Western-blot结果显示,印度豪猪蛋白及甲状旁腺激素相关肽蛋白表达均随磁场刺激时间的延长增加,不同时间磁场刺激组印度刺猬蛋白表达高于空白对照组(P<0.01);甲状旁腺激素相关肽的表达量也随之上升,但当磁场刺激4,6 d后的甲状旁腺激素相关肽蛋白表达与空白对照组差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01).提示强度为1 mT,频率为50 MHz的脉冲电磁场能促进前软骨干细胞向成熟软骨细胞增殖分化,其作用机制可能与改变Ihh/PTHrP信号通路活性有关.
揹景:前期研究證實脈遲電磁場對前軟骨榦細胞增殖具有促進作用,但其作用機製不明確.目的:進一步探討脈遲電磁場對前軟骨榦細胞增殖分化的影響,併觀察其對前軟骨榦細胞Ihh/PTHrP信號通路活性的影響.方法:採用免疫磁珠分選法穫取併純化SD大鼠前軟骨榦細胞,使用頻率為50 MHz,電場彊度為1 mT的脈遲電磁場進行榦預,0.5 h,次,2次/d,榦預2,4,6 d後收集細胞,以不給予磁場刺激的為空白對照.通過RT-PCR法檢測細胞Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖的基因錶達水平,再通過Western-blot法測定各組細胞印度刺猬蛋白、甲狀徬腺激素相關肽蛋白的錶達水平.結果與結論:RT.PCR結果顯示,Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖的錶達隨磁場刺激時間延長而增高,且經磁場刺激前軟骨榦細胞的聚集蛋白聚糖明顯高于空白對照組(P<0.05,P<0.01). Western-blot結果顯示,印度豪豬蛋白及甲狀徬腺激素相關肽蛋白錶達均隨磁場刺激時間的延長增加,不同時間磁場刺激組印度刺猬蛋白錶達高于空白對照組(P<0.01);甲狀徬腺激素相關肽的錶達量也隨之上升,但噹磁場刺激4,6 d後的甲狀徬腺激素相關肽蛋白錶達與空白對照組差異有顯著性意義(P<0.05,P<0.01).提示彊度為1 mT,頻率為50 MHz的脈遲電磁場能促進前軟骨榦細胞嚮成熟軟骨細胞增殖分化,其作用機製可能與改變Ihh/PTHrP信號通路活性有關.
배경:전기연구증실맥충전자장대전연골간세포증식구유촉진작용,단기작용궤제불명학.목적:진일보탐토맥충전자장대전연골간세포증식분화적영향,병관찰기대전연골간세포Ihh/PTHrP신호통로활성적영향.방법:채용면역자주분선법획취병순화SD대서전연골간세포,사용빈솔위50 MHz,전장강도위1 mT적맥충전자장진행간예,0.5 h,차,2차/d,간예2,4,6 d후수집세포,이불급여자장자격적위공백대조.통과RT-PCR법검측세포Ⅱ형효원화취집단백취당적기인표체수평,재통과Western-blot법측정각조세포인도자위단백、갑상방선격소상관태단백적표체수평.결과여결론:RT.PCR결과현시,Ⅱ형효원화취집단백취당적표체수자장자격시간연장이증고,차경자장자격전연골간세포적취집단백취당명현고우공백대조조(P<0.05,P<0.01). Western-blot결과현시,인도호저단백급갑상방선격소상관태단백표체균수자장자격시간적연장증가,불동시간자장자격조인도자위단백표체고우공백대조조(P<0.01);갑상방선격소상관태적표체량야수지상승,단당자장자격4,6 d후적갑상방선격소상관태단백표체여공백대조조차이유현저성의의(P<0.05,P<0.01).제시강도위1 mT,빈솔위50 MHz적맥충전자장능촉진전연골간세포향성숙연골세포증식분화,기작용궤제가능여개변Ihh/PTHrP신호통로활성유관.