中南林业科技大学学报
中南林業科技大學學報
중남임업과기대학학보
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY OF FORESTRY & TECHNOLOGY
2011年
4期
97-103
,共7页
范海艳%曹福祥%彭继庆%龙绛雪%邓明%司书斌
範海豔%曹福祥%彭繼慶%龍絳雪%鄧明%司書斌
범해염%조복상%팽계경%룡강설%산명%사서빈
博白大果油茶%单因素设计%ISSR-PCR%反应体系优化
博白大果油茶%單因素設計%ISSR-PCR%反應體繫優化
박백대과유다%단인소설계%ISSR-PCR%반응체계우화
以博白大果油茶Camellia gigantocarpn Hu et Huang为材料,通过单因素实验设计和正交设计L18(35)对影响PCR反应体系的主要成分及PCR扩增程序进行优化.建立了稳定的、可重复的博白大果油茶ISSRPCR扩增反应体系.在20μL的反应体系中,Mg2+浓度为2.5 mmol/L,模板DNA用量为20 ng,Taq DNA聚合酶为1.75 U,dNTPs浓度为0.25 mmol/L,引物浓度为0.6 mm01/L.反应程序为:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,50℃退火45 s,72℃延伸90 s,35个循环,72℃延伸7 min,4℃保存.
以博白大果油茶Camellia gigantocarpn Hu et Huang為材料,通過單因素實驗設計和正交設計L18(35)對影響PCR反應體繫的主要成分及PCR擴增程序進行優化.建立瞭穩定的、可重複的博白大果油茶ISSRPCR擴增反應體繫.在20μL的反應體繫中,Mg2+濃度為2.5 mmol/L,模闆DNA用量為20 ng,Taq DNA聚閤酶為1.75 U,dNTPs濃度為0.25 mmol/L,引物濃度為0.6 mm01/L.反應程序為:94℃預變性4 min,94℃變性30 s,50℃退火45 s,72℃延伸90 s,35箇循環,72℃延伸7 min,4℃保存.
이박백대과유다Camellia gigantocarpn Hu et Huang위재료,통과단인소실험설계화정교설계L18(35)대영향PCR반응체계적주요성분급PCR확증정서진행우화.건립료은정적、가중복적박백대과유다ISSRPCR확증반응체계.재20μL적반응체계중,Mg2+농도위2.5 mmol/L,모판DNA용량위20 ng,Taq DNA취합매위1.75 U,dNTPs농도위0.25 mmol/L,인물농도위0.6 mm01/L.반응정서위:94℃예변성4 min,94℃변성30 s,50℃퇴화45 s,72℃연신90 s,35개순배,72℃연신7 min,4℃보존.
