生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
6期
99-103
,共5页
钟玉民%刘达博%冯冰冰%陈慧%林国文%李家乐
鐘玉民%劉達博%馮冰冰%陳慧%林國文%李傢樂
종옥민%류체박%풍빙빙%진혜%림국문%리가악
缢蛏%SRAP%正交设计%优化
縊蟶%SRAP%正交設計%優化
액정%SRAP%정교설계%우화
运用L16(45)正交设计对影响缢蛏SRAP-PCR反应的5个因素:Taq酶浓度、Mg2+浓度、模板DNA浓度、dNTPs浓度和引物浓度在4个水平上进行了优化试验,PCR结果采用SPSS v16.0软件分析.结果表明,各因素对SRAP-PCR反应的影响依次为:引物>Taq酶>模板DNA>Mg2+;缢蛏SRAP反应最佳体系为:在20μL PCR反应体系中,引物0.3 μmol/L、Taq 酶0.5 U、模板DNA 50 ng、dNTPs 0.2 mmol/L及Mg2+2 mmol/L.用不同缢蛏的基因组DNA两次SRAP-PCR扩增,8对引物均能扩增出清晰且重复性好的谱带.因而建立的缢蛏反应体系稳定可靠.
運用L16(45)正交設計對影響縊蟶SRAP-PCR反應的5箇因素:Taq酶濃度、Mg2+濃度、模闆DNA濃度、dNTPs濃度和引物濃度在4箇水平上進行瞭優化試驗,PCR結果採用SPSS v16.0軟件分析.結果錶明,各因素對SRAP-PCR反應的影響依次為:引物>Taq酶>模闆DNA>Mg2+;縊蟶SRAP反應最佳體繫為:在20μL PCR反應體繫中,引物0.3 μmol/L、Taq 酶0.5 U、模闆DNA 50 ng、dNTPs 0.2 mmol/L及Mg2+2 mmol/L.用不同縊蟶的基因組DNA兩次SRAP-PCR擴增,8對引物均能擴增齣清晰且重複性好的譜帶.因而建立的縊蟶反應體繫穩定可靠.
운용L16(45)정교설계대영향액정SRAP-PCR반응적5개인소:Taq매농도、Mg2+농도、모판DNA농도、dNTPs농도화인물농도재4개수평상진행료우화시험,PCR결과채용SPSS v16.0연건분석.결과표명,각인소대SRAP-PCR반응적영향의차위:인물>Taq매>모판DNA>Mg2+;액정SRAP반응최가체계위:재20μL PCR반응체계중,인물0.3 μmol/L、Taq 매0.5 U、모판DNA 50 ng、dNTPs 0.2 mmol/L급Mg2+2 mmol/L.용불동액정적기인조DNA량차SRAP-PCR확증,8대인물균능확증출청석차중복성호적보대.인이건립적액정반응체계은정가고.
