军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2011年
11期
842-846
,共5页
邵长林%孙忠科%尚伟%袁静%廖祥儒
邵長林%孫忠科%尚偉%袁靜%廖祥儒
소장림%손충과%상위%원정%료상유
粪肠球菌%群体感应%luxS基因%AI-2活性
糞腸毬菌%群體感應%luxS基因%AI-2活性
분장구균%군체감응%luxS기인%AI-2활성
目的 研究粪肠球菌群体感应系统luxS基因的功能并体外合成AI-2信号分子,为研究粪肠球菌LuxS/AI-2依赖的群体感应系统提供依据.方法 以哈氏弧菌BB170作为报告菌株,检测3株粪肠球菌培养上清的AI-2活性,然后从粪肠球菌中扩增出luxS和pfs基因,测序和比对氨基酸序列,并将两基因插入到pGEX-4T-1表达载体中,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现表达与纯化,进而以S-腺苷高半胱氨酸为底物、纯化的蛋白或构建的大肠杆菌菌体蛋白为反应酶,体外合成AI-2.结果 3株粪肠球菌均能够分泌有活性的AI-2信号分子;LuxS蛋白序列分析发现其与哈氏弧菌、沙门菌、大肠杆菌具有高度同源性;SAH均可以与纯化的蛋白或构建的大肠杆菌菌体蛋白合成出有活性的AI-2分子.结论 粪肠球菌存在LuxS/AI-2依赖的群体感应系统,AI-2的产生依赖于luxS基因.
目的 研究糞腸毬菌群體感應繫統luxS基因的功能併體外閤成AI-2信號分子,為研究糞腸毬菌LuxS/AI-2依賴的群體感應繫統提供依據.方法 以哈氏弧菌BB170作為報告菌株,檢測3株糞腸毬菌培養上清的AI-2活性,然後從糞腸毬菌中擴增齣luxS和pfs基因,測序和比對氨基痠序列,併將兩基因插入到pGEX-4T-1錶達載體中,轉化至大腸桿菌BL21(DE3)中實現錶達與純化,進而以S-腺苷高半胱氨痠為底物、純化的蛋白或構建的大腸桿菌菌體蛋白為反應酶,體外閤成AI-2.結果 3株糞腸毬菌均能夠分泌有活性的AI-2信號分子;LuxS蛋白序列分析髮現其與哈氏弧菌、沙門菌、大腸桿菌具有高度同源性;SAH均可以與純化的蛋白或構建的大腸桿菌菌體蛋白閤成齣有活性的AI-2分子.結論 糞腸毬菌存在LuxS/AI-2依賴的群體感應繫統,AI-2的產生依賴于luxS基因.
목적 연구분장구균군체감응계통luxS기인적공능병체외합성AI-2신호분자,위연구분장구균LuxS/AI-2의뢰적군체감응계통제공의거.방법 이합씨호균BB170작위보고균주,검측3주분장구균배양상청적AI-2활성,연후종분장구균중확증출luxS화pfs기인,측서화비대안기산서렬,병장량기인삽입도pGEX-4T-1표체재체중,전화지대장간균BL21(DE3)중실현표체여순화,진이이S-선감고반광안산위저물、순화적단백혹구건적대장간균균체단백위반응매,체외합성AI-2.결과 3주분장구균균능구분비유활성적AI-2신호분자;LuxS단백서렬분석발현기여합씨호균、사문균、대장간균구유고도동원성;SAH균가이여순화적단백혹구건적대장간균균체단백합성출유활성적AI-2분자.결론 분장구균존재LuxS/AI-2의뢰적군체감응계통,AI-2적산생의뢰우luxS기인.
