CAJ | 학술논문

目的探讨湖南省肾综合征出血热(HFRS)患者及宿主动物黑线姬鼠携带汉坦病毒的基因型别及序列特征.方法应用免疫荧光试验(IFA)对鼠肺标本进行粗筛,提取IFA阳性鼠肺组织及HFRS患者血清总RNA,设计汉坦病毒M、S基因特异性引物,应用RT-PCR技术进行扩增,回收阳性扩增产物并克隆到pMD-18T载体进行序列测定,将所测序列与国内外HTNV及SEOV病毒株序列进行核苷酸同源性分析,应用MEGA5.0.4软件构建M、S基因种系进化树,结果 IFA阳性鼠肺标本荧光显微镜下可见做在的黄绿色针尖大小样颗粒;RT-PCR法扩增汉坦病毒M、S基因,HTNV通用引物可见490bp与593 bp的阳性条带;阳性产物进一步应用HTNV分型引物进行M、S基因检测,分别扩增出-约242 bp与276 bp大小的条带;SEO型特异性M、S基因片段内侧引物扩增反应均为阴性;编号为Hunan01、Hunan02、Hunan03的M、S基因序列与HTNV型84FLi株、SN7株的同源性最高,与SEOV型Gou3株的同源性最低;种系进化分析表明,Hunan01、Hunan02、Hu-nan03为汉坦病毒H5亚型.结论湖南省存在HTNV型感染病例与宿主动物,基因分型技术能进一步对病毒亚型进行鉴定.
목적 탐토호남성신종합정출혈열(HFRS)환자급숙주동물흑선희서휴대한탄병독적기인형별급서렬특정.방법 응용면역형광시험(IFA)대서폐표본진행조사,제취IFA양성서폐조직급HFRS환자혈청총RNA,설계한탄병독M、S기인특이성인물,응용RT-PCR기술진행확증,회수양성확증산물병극륭도pMD-18T재체진행서렬측정,장소측서렬여국내외HTNV급SEOV병독주서렬진행핵감산동원성분석,응용MEGA5.0.4연건구건M、S기인충계진화수,결과 IFA양성서폐표본형광현미경하가견주재적황록색침첨대소양과립;RT-PCR법확증한탄병독M、S기인,HTNV통용인물가견490bp여593 bp적양성조대;양성산물진일보응용HTNV분형인물진행M、S기인검측,분별확증출-약242 bp여276 bp대소적조대;SEO형특이성M、S기인편단내측인물확증반응균위음성;편호위Hunan01、Hunan02、Hunan03적M、S기인서렬여HTNV형84FLi주、SN7주적동원성최고,여SEOV형Gou3주적동원성최저;충계진화분석표명,Hunan01、Hunan02、Hu-nan03위한탄병독H5아형.결론호남성존재HTNV형감염병례여숙주동물,기인분형기술능진일보대병독아형진행감정.