中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2011年
12期
899-904
,共6页
严凌斌%洪文荣%方志锴%封成军
嚴凌斌%洪文榮%方誌鍇%封成軍
엄릉빈%홍문영%방지개%봉성군
绛红色小单孢菌%接合转移%庆大霉素
絳紅色小單孢菌%接閤轉移%慶大黴素
강홍색소단포균%접합전이%경대매소
目的 构建绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)的接合转移体系,并对该体系进行优化.方法 以绛红色小单孢菌G1008染色体DNA为模板,经PCR扩增甲基化酶基因gntK的上下游序列各2000bp左右作为同源交换臂,并将红霉素抗性基因作为筛选标记插入两交换臂之间.以温敏型质粒pKC 1139作为基本载体,构建重组质粒pFD306.借助接合转移技术,将该质粒导入绛红色小单孢菌G1008.结果 经抗性筛选,得到一株阳性菌株,命名为GK1008,经PCR鉴定和测序,验证了重组质粒已整合到染色体上.GK1008菌株对红霉素和安普霉素的抗性均超过500μg/mL.结论 绛红色小单孢菌接合转移体系的构建达到了预期目的,并实现了对该体系的优化,这为其它小单孢菌的分子遗传学操作提供了借鉴.
目的 構建絳紅色小單孢菌(Micromonospora purpurea)的接閤轉移體繫,併對該體繫進行優化.方法 以絳紅色小單孢菌G1008染色體DNA為模闆,經PCR擴增甲基化酶基因gntK的上下遊序列各2000bp左右作為同源交換臂,併將紅黴素抗性基因作為篩選標記插入兩交換臂之間.以溫敏型質粒pKC 1139作為基本載體,構建重組質粒pFD306.藉助接閤轉移技術,將該質粒導入絳紅色小單孢菌G1008.結果 經抗性篩選,得到一株暘性菌株,命名為GK1008,經PCR鑒定和測序,驗證瞭重組質粒已整閤到染色體上.GK1008菌株對紅黴素和安普黴素的抗性均超過500μg/mL.結論 絳紅色小單孢菌接閤轉移體繫的構建達到瞭預期目的,併實現瞭對該體繫的優化,這為其它小單孢菌的分子遺傳學操作提供瞭藉鑒.
목적 구건강홍색소단포균(Micromonospora purpurea)적접합전이체계,병대해체계진행우화.방법 이강홍색소단포균G1008염색체DNA위모판,경PCR확증갑기화매기인gntK적상하유서렬각2000bp좌우작위동원교환비,병장홍매소항성기인작위사선표기삽입량교환비지간.이온민형질립pKC 1139작위기본재체,구건중조질립pFD306.차조접합전이기술,장해질립도입강홍색소단포균G1008.결과 경항성사선,득도일주양성균주,명명위GK1008,경PCR감정화측서,험증료중조질립이정합도염색체상.GK1008균주대홍매소화안보매소적항성균초과500μg/mL.결론 강홍색소단포균접합전이체계적구건체도료예기목적,병실현료대해체계적우화,저위기타소단포균적분자유전학조작제공료차감.
