医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2005年
1期
5-9
,共5页
甲醇酵母%食管癌相关基因1%分泌表达
甲醇酵母%食管癌相關基因1%分泌錶達
갑순효모%식관암상관기인1%분비표체
目的为获得食管癌相关基因1(ECRG1)编码的活性蛋白,利用甲醇酵母系统表达ECRG1.方法将本研究室构建的PCDNA6-HA-ECRG1重组到分泌表达载体pPIC9k中,然后转入酵母GS115,通过G418筛选,在甲醇的诱导下,获得表达的蛋白.结果成功构建了分泌表达重组体pPIC9k-ECRG1,并转入了GS115,筛到抗2.5 mg/ml G418的重组菌株,在甲醇的诱导下,ECRG1蛋白得到了分泌表达,发酵培养获得的融合蛋白经镍离子亲和层析,得到纯度80 %左右的蛋白.结论用酵母表达系统得到了活性蛋白,可用于进一步的生物功能及作用机理的研究,也为今后研究基因-蛋白的功能与结构,提供了分离和纯化蛋白的重要方法.
目的為穫得食管癌相關基因1(ECRG1)編碼的活性蛋白,利用甲醇酵母繫統錶達ECRG1.方法將本研究室構建的PCDNA6-HA-ECRG1重組到分泌錶達載體pPIC9k中,然後轉入酵母GS115,通過G418篩選,在甲醇的誘導下,穫得錶達的蛋白.結果成功構建瞭分泌錶達重組體pPIC9k-ECRG1,併轉入瞭GS115,篩到抗2.5 mg/ml G418的重組菌株,在甲醇的誘導下,ECRG1蛋白得到瞭分泌錶達,髮酵培養穫得的融閤蛋白經鎳離子親和層析,得到純度80 %左右的蛋白.結論用酵母錶達繫統得到瞭活性蛋白,可用于進一步的生物功能及作用機理的研究,也為今後研究基因-蛋白的功能與結構,提供瞭分離和純化蛋白的重要方法.
목적위획득식관암상관기인1(ECRG1)편마적활성단백,이용갑순효모계통표체ECRG1.방법장본연구실구건적PCDNA6-HA-ECRG1중조도분비표체재체pPIC9k중,연후전입효모GS115,통과G418사선,재갑순적유도하,획득표체적단백.결과성공구건료분비표체중조체pPIC9k-ECRG1,병전입료GS115,사도항2.5 mg/ml G418적중조균주,재갑순적유도하,ECRG1단백득도료분비표체,발효배양획득적융합단백경얼리자친화층석,득도순도80 %좌우적단백.결론용효모표체계통득도료활성단백,가용우진일보적생물공능급작용궤리적연구,야위금후연구기인-단백적공능여결구,제공료분리화순화단백적중요방법.
