CAJ | 학술논문

背景与目的:近年来,核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)成分、结构与功能改变在肿瘤发生发展过程中的作用已成为人们研究的热点问题.分离并鉴定肿瘤相关的NMPs,是寻找肿瘤特异性标志物并进一步研究肿瘤发病机制的一个新途径.本研究通过检测类视网膜母细胞瘤结合蛋白8(similar to retinoblastoma binding protein 8,STRBP8)在人永生化食管上皮细胞癌变过程中的差异表达,为寻找食管癌特异性标志物和研究食管癌的发病机制提供新线索.方法:硫酸铵沉淀法提取人胚永生化食管上皮细胞系SHEE和由SHEE转化而来的食管癌细胞系SHEEC的NMPs,利用双向电泳、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和RT-PCR等技术检测STRBP8在SHEE和SHEEC中的差异表达.将STRBP8 cDNA序列连接到pGEM-T easy载体后,转化TOP10F'大肠杆菌感受态细胞,经筛选获得含STRBP8的阳性克隆,DNA序列测定后进行BLAST比对.结果:通过双向电泳和MALDI-TOF-MS技术分离并鉴定出核基质蛋白STRBP8只在SHEEC中表达,RT-PCR分析发现STRBP8 mRNA也只出现在SHEEC细胞中.将其cDNA序列插入pGEM-T easy载体后,经转化和筛选获得含STRBP8的阳性克隆.测序结果显示克隆得到的STRBP8 cDNA片段与Genbank 数据库上的序列完全一致.结论:STRBP8作为一种新的候选癌基因可能与食管上皮细胞的癌变相关,它的发现为寻找食管癌特异性标志物和研究食管癌的发病机制奠定了基础.
배경여목적:근년래,핵기질단백(nuclear matrix proteins,NMPs)성분、결구여공능개변재종류발생발전과정중적작용이성위인문연구적열점문제.분리병감정종류상관적NMPs,시심조종류특이성표지물병진일보연구종류발병궤제적일개신도경.본연구통과검측류시망막모세포류결합단백8(similar to retinoblastoma binding protein 8,STRBP8)재인영생화식관상피세포암변과정중적차이표체,위심조식관암특이성표지물화연구식관암적발병궤제제공신선색.방법:류산안침정법제취인배영생화식관상피세포계SHEE화유SHEE전화이래적식관암세포계SHEEC적NMPs,이용쌍향전영、기질보조격광해흡전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)화RT-PCR등기술검측STRBP8재SHEE화SHEEC중적차이표체.장STRBP8 cDNA서렬련접도pGEM-T easy재체후,전화TOP10F'대장간균감수태세포,경사선획득함STRBP8적양성극륭,DNA서렬측정후진행BLAST비대.결과:통과쌍향전영화MALDI-TOF-MS기술분리병감정출핵기질단백STRBP8지재SHEEC중표체,RT-PCR분석발현STRBP8 mRNA야지출현재SHEEC세포중.장기cDNA서렬삽입pGEM-T easy재체후,경전화화사선획득함STRBP8적양성극륭.측서결과현시극륭득도적STRBP8 cDNA편단여Genbank 수거고상적서렬완전일치.결론:STRBP8작위일충신적후선암기인가능여식관상피세포적암변상관,타적발현위심조식관암특이성표지물화연구식관암적발병궤제전정료기출.