中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2006年
3期
250-253,317
,共5页
王烈峰%汪华侨%张革%邹俊涛%谢瑶%袁群芳%姚志彬
王烈峰%汪華僑%張革%鄒俊濤%謝瑤%袁群芳%姚誌彬
왕렬봉%왕화교%장혁%추준도%사요%원군방%요지빈
老年性痴呆%β-淀粉样蛋白%Tg2576转基因鼠%重组质粒%真核表达载体
老年性癡呆%β-澱粉樣蛋白%Tg2576轉基因鼠%重組質粒%真覈錶達載體
노년성치태%β-정분양단백%Tg2576전기인서%중조질립%진핵표체재체
[目的]构建以β-淀粉样蛋白为靶单价及二价真核表达载体pcDNA3.1-Aβ1-42、pcDNA3.1-Aβ42x2,并在真核细胞中表达目的蛋白.[方法]PCR法扩增编码β-淀粉样蛋白的目的基因,利用基因克隆技术构建单价及二价真核表达载体;应用酶切及测序鉴定真核表达载体构建成功后,用Westem blot和细胞免疫组化染色检测其在真核细胞中的表达.[结果]相应的双酶酶切能够获得插入的目的基因片段(分别为137 bp和269 bp),测序未发现突变;Westem blot结果可见两条约为4 ku和8 ku的条带,细胞免疫组化染色可见阳性细胞.[结论]单价及二价真核表达载体构建成功;真核表达载体能在真核细胞中表达出目的蛋白.
[目的]構建以β-澱粉樣蛋白為靶單價及二價真覈錶達載體pcDNA3.1-Aβ1-42、pcDNA3.1-Aβ42x2,併在真覈細胞中錶達目的蛋白.[方法]PCR法擴增編碼β-澱粉樣蛋白的目的基因,利用基因剋隆技術構建單價及二價真覈錶達載體;應用酶切及測序鑒定真覈錶達載體構建成功後,用Westem blot和細胞免疫組化染色檢測其在真覈細胞中的錶達.[結果]相應的雙酶酶切能夠穫得插入的目的基因片段(分彆為137 bp和269 bp),測序未髮現突變;Westem blot結果可見兩條約為4 ku和8 ku的條帶,細胞免疫組化染色可見暘性細胞.[結論]單價及二價真覈錶達載體構建成功;真覈錶達載體能在真覈細胞中錶達齣目的蛋白.
[목적]구건이β-정분양단백위파단개급이개진핵표체재체pcDNA3.1-Aβ1-42、pcDNA3.1-Aβ42x2,병재진핵세포중표체목적단백.[방법]PCR법확증편마β-정분양단백적목적기인,이용기인극륭기술구건단개급이개진핵표체재체;응용매절급측서감정진핵표체재체구건성공후,용Westem blot화세포면역조화염색검측기재진핵세포중적표체.[결과]상응적쌍매매절능구획득삽입적목적기인편단(분별위137 bp화269 bp),측서미발현돌변;Westem blot결과가견량조약위4 ku화8 ku적조대,세포면역조화염색가견양성세포.[결론]단개급이개진핵표체재체구건성공;진핵표체재체능재진핵세포중표체출목적단백.
