中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2008年
2期
149-152,160
,共5页
李雪平%邓国华%田国斌%陈化兰
李雪平%鄧國華%田國斌%陳化蘭
리설평%산국화%전국빈%진화란
禽流感%单抗%ELISA
禽流感%單抗%ELISA
금류감%단항%ELISA
本研究用H9N2亚型禽流感病毒分离株A/Chicken/Shandong/6/1996(CK/SD/6/96)免疫6周龄BALB/c雌性小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.采用血凝抑制(HI)和ELISA方法筛选阳性细胞克隆,连续多次克隆培养后获得3株能稳定分泌H9亚型HA特异性单抗的细胞株1F4C4、9F12D1、2C5H12.3株阳性杂交瘤细胞的培养上清及腹水对CK/SD/6/96的HI效价分别为26、24、21和212、210、27.特异性试验表明该3株单抗均不与其他主要禽类病毒和其他14个HA亚型的禽流感病毒发生交叉反应.1F4C4和2C5H12抗体亚类为IgG2b,9F12D1为IgG2a.这3株单抗对H9亚型不同抗原群流感毒株有不同程度的中和作用,表现出单抗识别抗原位点的差异性,为进一步研究H9亚型流感病毒的抗原性差异以及抗原识别提供了物质基础和条件.
本研究用H9N2亞型禽流感病毒分離株A/Chicken/Shandong/6/1996(CK/SD/6/96)免疫6週齡BALB/c雌性小鼠,取免疫後小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞SP2/0融閤.採用血凝抑製(HI)和ELISA方法篩選暘性細胞剋隆,連續多次剋隆培養後穫得3株能穩定分泌H9亞型HA特異性單抗的細胞株1F4C4、9F12D1、2C5H12.3株暘性雜交瘤細胞的培養上清及腹水對CK/SD/6/96的HI效價分彆為26、24、21和212、210、27.特異性試驗錶明該3株單抗均不與其他主要禽類病毒和其他14箇HA亞型的禽流感病毒髮生交扠反應.1F4C4和2C5H12抗體亞類為IgG2b,9F12D1為IgG2a.這3株單抗對H9亞型不同抗原群流感毒株有不同程度的中和作用,錶現齣單抗識彆抗原位點的差異性,為進一步研究H9亞型流感病毒的抗原性差異以及抗原識彆提供瞭物質基礎和條件.
본연구용H9N2아형금류감병독분리주A/Chicken/Shandong/6/1996(CK/SD/6/96)면역6주령BALB/c자성소서,취면역후소서비세포여골수류세포SP2/0융합.채용혈응억제(HI)화ELISA방법사선양성세포극륭,련속다차극륭배양후획득3주능은정분비H9아형HA특이성단항적세포주1F4C4、9F12D1、2C5H12.3주양성잡교류세포적배양상청급복수대CK/SD/6/96적HI효개분별위26、24、21화212、210、27.특이성시험표명해3주단항균불여기타주요금류병독화기타14개HA아형적금류감병독발생교차반응.1F4C4화2C5H12항체아류위IgG2b,9F12D1위IgG2a.저3주단항대H9아형불동항원군류감독주유불동정도적중화작용,표현출단항식별항원위점적차이성,위진일보연구H9아형류감병독적항원성차이이급항원식별제공료물질기출화조건.