CAJ | 학술논문

胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号转导通路与各种正常生理活动及多种疾病发生密切相关.将IGF-1R来源的未磷酸化多肽序列LYASVNPEY固定于表面等离子体共振(SPR)生物传感器专用的CM5芯片表面,以含有相应蛋白激酶的细胞裂解液进行处理,利用SPR生物传感器和抗酪氨酸磷酸化抗体PY20进行酪氨酸磷酸化水平检测.结果表明:PY20能灵敏地检测多肽酪氨酸磷酸化水平变化,即能够区分不同孵育时间以及不同成分的细胞裂解液所引起的多肽酪氨酸磷酸化水平差异;研究了IGF-1R来源多肽的酪氨酸磷酸化对多肽-蛋白间相互作用的影响,证实了只存在磷酸化的多肽与其下游的胰岛素受体底物(IRS-1)相互作用,测定了此磷酸化的多肽与IRS-1的亲和常数(KA)为 (2.02 ± 0.09)×108 L mol-1、结合速率常数(ka)为(2.30±0.15)×106 L mol-1s-1以及解离速率常数(kd)为(1.14±0.13)×10-2 s-1.这种新型的模拟受体的多肽酪氨酸磷酸化研究方法可用于受体磷酸化信号通路的研究以及基于这些信号通路的药物筛选研究.
이도소양생장인자-1수체(IGF-1R)신호전도통로여각충정상생리활동급다충질병발생밀절상관.장IGF-1R래원적미린산화다태서렬LYASVNPEY고정우표면등리자체공진(SPR)생물전감기전용적CM5심편표면,이함유상응단백격매적세포렬해액진행처리,이용SPR생물전감기화항락안산린산화항체PY20진행락안산린산화수평검측.결과표명:PY20능령민지검측다태락안산린산화수평변화,즉능구구분불동부육시간이급불동성분적세포렬해액소인기적다태락안산린산화수평차이;연구료IGF-1R래원다태적락안산린산화대다태-단백간상호작용적영향,증실료지존재린산화적다태여기하유적이도소수체저물(IRS-1)상호작용,측정료차린산화적다태여IRS-1적친화상수(KA)위 (2.02 ± 0.09)×108 L mol-1、결합속솔상수(ka)위(2.30±0.15)×106 L mol-1s-1이급해리속솔상수(kd)위(1.14±0.13)×10-2 s-1.저충신형적모의수체적다태락안산린산화연구방법가용우수체린산화신호통로적연구이급기우저사신호통로적약물사선연구.