现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2010年
12期
2300-2304
,共5页
尹肖云%王晓礽%孟元光%伍志强%韩为东
尹肖雲%王曉礽%孟元光%伍誌彊%韓為東
윤초운%왕효잉%맹원광%오지강%한위동
白血病相关蛋白16%绿色荧光蛋白%亚细胞定位%乳腺癌
白血病相關蛋白16%綠色熒光蛋白%亞細胞定位%乳腺癌
백혈병상관단백16%록색형광단백%아세포정위%유선암
目的:研究白血病相关蛋白LRP16基因编码蛋白在真核细胞内的亚定位分布.方法:将LRP16全长基因序列(长型/L型)与LRP16天然缺失体编码序列(短型/S型)融合到绿色荧光蛋白pEGFP真核表达载体的N端,转染鼠成纤维NIH3T3、人乳腺癌MCF-7细胞株,观察绿色荧光的分布;采用细胞免疫荧光染色(CIF)方法和激光共聚焦显微镜进一步鉴定内源性LRP16蛋白在上皮起源性肿瘤乳腺癌MCF-7、宫颈癌Hela,人胚肾293T细胞株的亚细胞分布.结果:绿色荧光融合蛋白LRP16-pEGFP L型在NIH3T3细胞系中以细胞浆型分布为主,在MCF-7中以细胞核型分布为主,绿色荧光融合蛋白LRP16-pEGFP S型在真核细胞内呈核浆均匀分布;CIF染色结果表明内源性LRP16(长型/L型)蛋白在MCF-7、Hela和293T细胞中分别亚定位于细胞核.结论:LRP16是在上皮起源性肿瘤细胞中作为核因子参与其进展,野生型LRP16(长型/ L型)前82个氨基酸在决定LRP16亚定位方面发挥关键作用.
目的:研究白血病相關蛋白LRP16基因編碼蛋白在真覈細胞內的亞定位分佈.方法:將LRP16全長基因序列(長型/L型)與LRP16天然缺失體編碼序列(短型/S型)融閤到綠色熒光蛋白pEGFP真覈錶達載體的N耑,轉染鼠成纖維NIH3T3、人乳腺癌MCF-7細胞株,觀察綠色熒光的分佈;採用細胞免疫熒光染色(CIF)方法和激光共聚焦顯微鏡進一步鑒定內源性LRP16蛋白在上皮起源性腫瘤乳腺癌MCF-7、宮頸癌Hela,人胚腎293T細胞株的亞細胞分佈.結果:綠色熒光融閤蛋白LRP16-pEGFP L型在NIH3T3細胞繫中以細胞漿型分佈為主,在MCF-7中以細胞覈型分佈為主,綠色熒光融閤蛋白LRP16-pEGFP S型在真覈細胞內呈覈漿均勻分佈;CIF染色結果錶明內源性LRP16(長型/L型)蛋白在MCF-7、Hela和293T細胞中分彆亞定位于細胞覈.結論:LRP16是在上皮起源性腫瘤細胞中作為覈因子參與其進展,野生型LRP16(長型/ L型)前82箇氨基痠在決定LRP16亞定位方麵髮揮關鍵作用.
목적:연구백혈병상관단백LRP16기인편마단백재진핵세포내적아정위분포.방법:장LRP16전장기인서렬(장형/L형)여LRP16천연결실체편마서렬(단형/S형)융합도록색형광단백pEGFP진핵표체재체적N단,전염서성섬유NIH3T3、인유선암MCF-7세포주,관찰록색형광적분포;채용세포면역형광염색(CIF)방법화격광공취초현미경진일보감정내원성LRP16단백재상피기원성종류유선암MCF-7、궁경암Hela,인배신293T세포주적아세포분포.결과:록색형광융합단백LRP16-pEGFP L형재NIH3T3세포계중이세포장형분포위주,재MCF-7중이세포핵형분포위주,록색형광융합단백LRP16-pEGFP S형재진핵세포내정핵장균균분포;CIF염색결과표명내원성LRP16(장형/L형)단백재MCF-7、Hela화293T세포중분별아정위우세포핵.결론:LRP16시재상피기원성종류세포중작위핵인자삼여기진전,야생형LRP16(장형/ L형)전82개안기산재결정LRP16아정위방면발휘관건작용.
