临床儿科杂志
臨床兒科雜誌
림상인과잡지
2012年
1期
66-69
,共4页
支气管哮喘%白三烯%氧化应激%γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶%人气道上皮细胞
支氣管哮喘%白三烯%氧化應激%γ-穀氨酰半胱氨痠閤成酶%人氣道上皮細胞
지기관효천%백삼희%양화응격%γ-곡안선반광안산합성매%인기도상피세포
目的 研究白三烯诱导人呼吸道上皮细胞内谷胱甘肽氧化还原状态变化及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的作用.方法 将人气道上皮细胞分为对照组和暴露组.暴露组的人气道上皮细胞暴露于白三烯2、4、6、12 h.检测对照组及暴露组在2、4、6、12 h相应指标.测定气道上皮细胞内谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量;双酶法测定γ-GCS活性;RT-PCR检测气道上皮细胞中γ-GCS-mRNA表达;Western-blot检测气道上皮细胞核和细胞质中γ-GCS蛋白表达;细胞免疫荧光法检测气道上皮细胞γ-GCS蛋白表达.结果 暴露组细胞2、4、6、12 h的GSH含量、GSH/GSSG比值先减少后逐渐增加,4 h最低,6 h达最高,12 h恢复正常;而GSSG含量则呈现相反趋势,与对照组之间差异有统计学意义.暴露组细胞2、4、6 h,γ-GCS活性增强,与对照组比较差异有统计学意义.细胞免疫荧光法检测气道上皮细胞γ-GCS蛋白阳性信号主要分布在胞质中,暴露组呈强阳性表达,而对照组表达较弱,暴露组2、4、6 h时与对照组比较,差异有统计学意义.Western-blot 检测结果相似.RT-PCR检测气道上皮细胞中γ-GCS-mRNA表达,暴露组2、4、6 h时较对照组增加,差异有统计学意义.结论 白三烯诱导氧化应激影响呼吸道上皮细胞谷胱甘肽氧化还原状态,而呼吸道上皮细胞通过提高γ-GCS活性对抗氧化应激,保持氧化还原稳定的状态.
目的 研究白三烯誘導人呼吸道上皮細胞內穀胱甘肽氧化還原狀態變化及γ-穀氨酰半胱氨痠閤成酶(γ-GCS)的作用.方法 將人氣道上皮細胞分為對照組和暴露組.暴露組的人氣道上皮細胞暴露于白三烯2、4、6、12 h.檢測對照組及暴露組在2、4、6、12 h相應指標.測定氣道上皮細胞內穀胱甘肽(GSH)和氧化型穀胱甘肽(GSSG)含量;雙酶法測定γ-GCS活性;RT-PCR檢測氣道上皮細胞中γ-GCS-mRNA錶達;Western-blot檢測氣道上皮細胞覈和細胞質中γ-GCS蛋白錶達;細胞免疫熒光法檢測氣道上皮細胞γ-GCS蛋白錶達.結果 暴露組細胞2、4、6、12 h的GSH含量、GSH/GSSG比值先減少後逐漸增加,4 h最低,6 h達最高,12 h恢複正常;而GSSG含量則呈現相反趨勢,與對照組之間差異有統計學意義.暴露組細胞2、4、6 h,γ-GCS活性增彊,與對照組比較差異有統計學意義.細胞免疫熒光法檢測氣道上皮細胞γ-GCS蛋白暘性信號主要分佈在胞質中,暴露組呈彊暘性錶達,而對照組錶達較弱,暴露組2、4、6 h時與對照組比較,差異有統計學意義.Western-blot 檢測結果相似.RT-PCR檢測氣道上皮細胞中γ-GCS-mRNA錶達,暴露組2、4、6 h時較對照組增加,差異有統計學意義.結論 白三烯誘導氧化應激影響呼吸道上皮細胞穀胱甘肽氧化還原狀態,而呼吸道上皮細胞通過提高γ-GCS活性對抗氧化應激,保持氧化還原穩定的狀態.
목적 연구백삼희유도인호흡도상피세포내곡광감태양화환원상태변화급γ-곡안선반광안산합성매(γ-GCS)적작용.방법 장인기도상피세포분위대조조화폭로조.폭로조적인기도상피세포폭로우백삼희2、4、6、12 h.검측대조조급폭로조재2、4、6、12 h상응지표.측정기도상피세포내곡광감태(GSH)화양화형곡광감태(GSSG)함량;쌍매법측정γ-GCS활성;RT-PCR검측기도상피세포중γ-GCS-mRNA표체;Western-blot검측기도상피세포핵화세포질중γ-GCS단백표체;세포면역형광법검측기도상피세포γ-GCS단백표체.결과 폭로조세포2、4、6、12 h적GSH함량、GSH/GSSG비치선감소후축점증가,4 h최저,6 h체최고,12 h회복정상;이GSSG함량칙정현상반추세,여대조조지간차이유통계학의의.폭로조세포2、4、6 h,γ-GCS활성증강,여대조조비교차이유통계학의의.세포면역형광법검측기도상피세포γ-GCS단백양성신호주요분포재포질중,폭로조정강양성표체,이대조조표체교약,폭로조2、4、6 h시여대조조비교,차이유통계학의의.Western-blot 검측결과상사.RT-PCR검측기도상피세포중γ-GCS-mRNA표체,폭로조2、4、6 h시교대조조증가,차이유통계학의의.결론 백삼희유도양화응격영향호흡도상피세포곡광감태양화환원상태,이호흡도상피세포통과제고γ-GCS활성대항양화응격,보지양화환원은정적상태.
