生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
12期
166-170
,共5页
李玲%傅达奇%朱毅%田慧琴%罗云波%朱本忠
李玲%傅達奇%硃毅%田慧琴%囉雲波%硃本忠
리령%부체기%주의%전혜금%라운파%주본충
染色质免疫共沉淀技术%转录因子RIN%LeACS2基因%LeACS4基因%番茄果实
染色質免疫共沉澱技術%轉錄因子RIN%LeACS2基因%LeACS4基因%番茄果實
염색질면역공침정기술%전록인자RIN%LeACS2기인%LeACS4기인%번가과실
以粉红期番茄果实为材料,用含不同浓度甲醛的缓冲液交联DNA和蛋白质,利用超声波将其染色质随机断裂成大小为200-1 000 bp的片段,用RIN蛋白的特异性抗体免疫沉淀与RIN蛋白结合的DNA片段,然后解交联和纯化DNA片段,最终用普通PCR试验和测序验证与转录因子RIN结合的DNA序列.结果表明,适用于番茄果实的最佳ChIP试验条件为:用1％甲醛溶液交联DNA和蛋白质的复合物；用20％功率,工作6s,间隔10s,脉冲3次超声破碎该复合物,可以得到适当大小的片段,用于后续的试验.普通PCR和测序验证结果证明转录因子RIN与LeACS2和LeACS4启动子区域的CArG box序列结合.
以粉紅期番茄果實為材料,用含不同濃度甲醛的緩遲液交聯DNA和蛋白質,利用超聲波將其染色質隨機斷裂成大小為200-1 000 bp的片段,用RIN蛋白的特異性抗體免疫沉澱與RIN蛋白結閤的DNA片段,然後解交聯和純化DNA片段,最終用普通PCR試驗和測序驗證與轉錄因子RIN結閤的DNA序列.結果錶明,適用于番茄果實的最佳ChIP試驗條件為:用1％甲醛溶液交聯DNA和蛋白質的複閤物；用20％功率,工作6s,間隔10s,脈遲3次超聲破碎該複閤物,可以得到適噹大小的片段,用于後續的試驗.普通PCR和測序驗證結果證明轉錄因子RIN與LeACS2和LeACS4啟動子區域的CArG box序列結閤.
이분홍기번가과실위재료,용함불동농도갑철적완충액교련DNA화단백질,이용초성파장기염색질수궤단렬성대소위200-1 000 bp적편단,용RIN단백적특이성항체면역침정여RIN단백결합적DNA편단,연후해교련화순화DNA편단,최종용보통PCR시험화측서험증여전록인자RIN결합적DNA서렬.결과표명,괄용우번가과실적최가ChIP시험조건위:용1％갑철용액교련DNA화단백질적복합물；용20％공솔,공작6s,간격10s,맥충3차초성파쇄해복합물,가이득도괄당대소적편단,용우후속적시험.보통PCR화측서험증결과증명전록인자RIN여LeACS2화LeACS4계동자구역적CArG box서렬결합.
