北京中医药大学学报
北京中醫藥大學學報
북경중의약대학학보
JOURNAL OF BEIJING UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2012年
3期
178-182
,共5页
刘兰英%李伟%王耀献%赵宗江%张玉苹
劉蘭英%李偉%王耀獻%趙宗江%張玉蘋
류란영%리위%왕요헌%조종강%장옥평
消癥散结法%肾小管上皮细胞%整合素连接激酶%转化生长因子β1
消癥散結法%腎小管上皮細胞%整閤素連接激酶%轉化生長因子β1
소징산결법%신소관상피세포%정합소련접격매%전화생장인자β1
目的 研究消癥散结法对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人肾小管上皮细胞表达整合素连接激酶(ILK)的影响,探讨其在肾间质纤维化中的干预作用.方法 将消癥散结法复方总方拆为补方、散方,运用血清药理学方法分别制备总方、补方、散方、盐酸贝那普利含药血清.体外培养人肾小管上皮细胞,分为6组:空白组、TGF-β1组、贝纳普利组、总方组、补方组、散方组.将5％各含药血清培养基加入体外培养的肾小管上皮细胞,除空白组外均加入TGF-β1 10 μg/L,48 h后,提取细胞总蛋白及总RNA,分别采用免疫印迹法及逆转录-聚合酶链反应方法检测各组ILK蛋白及其mR-NA的表达.结果 空白组肾小管上皮细胞胞浆内ILK及其mRNA有少量表达,TGF-β1刺激后能够诱导肾小管上皮细胞ILK及其mRNA表达显著增加(与空白组相比P＜0.01)；与TGF-β1组相比,贝纳普利组和总方组、散方组肾小管上皮细胞ILK及其mRNA含量明显降低(P＜0.01)；补方组与TGF-β1组相比差异不明显(P＞0.05).结论 消癥散结法复方总方含药血清能抑制细胞ILK及其mRNA的表达,干预TGF-β1/ILK信号通路可能是其防治肾间质纤维化的机制之一.
目的 研究消癥散結法對轉化生長因子β1(TGF-β1)刺激人腎小管上皮細胞錶達整閤素連接激酶(ILK)的影響,探討其在腎間質纖維化中的榦預作用.方法 將消癥散結法複方總方拆為補方、散方,運用血清藥理學方法分彆製備總方、補方、散方、鹽痠貝那普利含藥血清.體外培養人腎小管上皮細胞,分為6組:空白組、TGF-β1組、貝納普利組、總方組、補方組、散方組.將5％各含藥血清培養基加入體外培養的腎小管上皮細胞,除空白組外均加入TGF-β1 10 μg/L,48 h後,提取細胞總蛋白及總RNA,分彆採用免疫印跡法及逆轉錄-聚閤酶鏈反應方法檢測各組ILK蛋白及其mR-NA的錶達.結果 空白組腎小管上皮細胞胞漿內ILK及其mRNA有少量錶達,TGF-β1刺激後能夠誘導腎小管上皮細胞ILK及其mRNA錶達顯著增加(與空白組相比P＜0.01)；與TGF-β1組相比,貝納普利組和總方組、散方組腎小管上皮細胞ILK及其mRNA含量明顯降低(P＜0.01)；補方組與TGF-β1組相比差異不明顯(P＞0.05).結論 消癥散結法複方總方含藥血清能抑製細胞ILK及其mRNA的錶達,榦預TGF-β1/ILK信號通路可能是其防治腎間質纖維化的機製之一.
목적 연구소징산결법대전화생장인자β1(TGF-β1)자격인신소관상피세포표체정합소련접격매(ILK)적영향,탐토기재신간질섬유화중적간예작용.방법 장소징산결법복방총방탁위보방、산방,운용혈청약이학방법분별제비총방、보방、산방、염산패나보리함약혈청.체외배양인신소관상피세포,분위6조:공백조、TGF-β1조、패납보리조、총방조、보방조、산방조.장5％각함약혈청배양기가입체외배양적신소관상피세포,제공백조외균가입TGF-β1 10 μg/L,48 h후,제취세포총단백급총RNA,분별채용면역인적법급역전록-취합매련반응방법검측각조ILK단백급기mR-NA적표체.결과 공백조신소관상피세포포장내ILK급기mRNA유소량표체,TGF-β1자격후능구유도신소관상피세포ILK급기mRNA표체현저증가(여공백조상비P＜0.01)；여TGF-β1조상비,패납보리조화총방조、산방조신소관상피세포ILK급기mRNA함량명현강저(P＜0.01)；보방조여TGF-β1조상비차이불명현(P＞0.05).결론 소징산결법복방총방함약혈청능억제세포ILK급기mRNA적표체,간예TGF-β1/ILK신호통로가능시기방치신간질섬유화적궤제지일.
