CAJ | 학술논문

本研究探讨与骨髓基质HS-5细胞直接接触对HEL白血病细胞耐药性的诱发作用及其机制.采用人急性红白血病HEL细胞株与HS-5细胞共培养模式模拟体内白血病细胞及其周围的造血微环境,应用CCK-8法检测HEL细胞对Ara-C,DNR,VP16,MTX等化疗药物的敏感性,流式细胞术检测HEL细胞周期时相分布,实时RT-PCR方法检测p19、p21、p27、MDR1、ABCG2、Bcl-2等基因的mRNA表达,Western blot方法检测p-AktSer473、p-GSK3βSer9、p-STAT3Tyr705、Bcl-2、cleaved-Notch1V1754及Hes1等蛋白表达.结果表明,与HS-5细胞共培养后的HEL细胞对4种化疗药物的敏感性均显著降低.在共培养24h时,HEL细胞阻滞于G0/G1期,G0/G1期的细胞比例明显增多.PCR结果显示,p21基因的转录水平随着共培养时间的延长逐渐上调；p19基因的mRNA水平在12 h时明显下调,随后又恢复；其它基因的改变均无统计学意义.Western blot结果表明,共培养后HEL细胞的p-AktSer473、p-GSK3βSer9、cleaved-Notch1V1754蛋白及Bcl-2蛋白表达上调,Hes1蛋白表达下调,p-STAT3Tyr705表达无明显变化.结论:直接接触骨髓基质HS-5细胞可增强HEL细胞对化疗药物的抵抗作用.
본연구탐토여골수기질HS-5세포직접접촉대HEL백혈병세포내약성적유발작용급기궤제.채용인급성홍백혈병HEL세포주여HS-5세포공배양모식모의체내백혈병세포급기주위적조혈미배경,응용CCK-8법검측HEL세포대Ara-C,DNR,VP16,MTX등화료약물적민감성,류식세포술검측HEL세포주기시상분포,실시RT-PCR방법검측p19、p21、p27、MDR1、ABCG2、Bcl-2등기인적mRNA표체,Western blot방법검측p-AktSer473、p-GSK3βSer9、p-STAT3Tyr705、Bcl-2、cleaved-Notch1V1754급Hes1등단백표체.결과표명,여HS-5세포공배양후적HEL세포대4충화료약물적민감성균현저강저.재공배양24h시,HEL세포조체우G0/G1기,G0/G1기적세포비례명현증다.PCR결과현시,p21기인적전록수평수착공배양시간적연장축점상조；p19기인적mRNA수평재12 h시명현하조,수후우회복；기타기인적개변균무통계학의의.Western blot결과표명,공배양후HEL세포적p-AktSer473、p-GSK3βSer9、cleaved-Notch1V1754단백급Bcl-2단백표체상조,Hes1단백표체하조,p-STAT3Tyr705표체무명현변화.결론:직접접촉골수기질HS-5세포가증강HEL세포대화료약물적저항작용.