中山医科大学学报
中山醫科大學學報
중산의과대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2002年
1期
10-13
,共4页
黄奕俊%龚守芳%邱鹏新%苏兴文%颜光美
黃奕俊%龔守芳%邱鵬新%囌興文%顏光美
황혁준%공수방%구붕신%소흥문%안광미
去极化%c-Jun%小脑颗粒神经元%凋亡
去極化%c-Jun%小腦顆粒神經元%凋亡
거겁화%c-Jun%소뇌과립신경원%조망
[目的] 观察重新去极化(redepolarization,25mmol/L K+)对原代培养的大鼠小脑颗粒神经元蛋白质c-Jun的影响,对去极化挽救神经元过程中c-Jun的作用及其调节机制进行初步探讨.[方法] 用Western blotting检测原代培养的大鼠小脑颗粒神经元胞内c-Jun总量及磷酸化水平;用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测编码基因c-jun表达水平;用免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)活性;用二乙酸荧光素(fluorescein diacetate, FDA)染色检测神经元存活率.[结果] 复极化(repolarization, 5 mmol/L K+)使小脑颗粒神经元的c-jun mRNA、c-Jun总量及磷酸化水平迅速增加,神经元存活率随后明显下降;复极化2 h后重新去极化,c-jun mRNA、c-Jun总量及磷酸化在2 h内恢复至正常水平,而神经元存活率维持在正常水平;JNK活性在极化转换前后未改变.[结论] c-Jun的抑制可能介导了重新去极化挽救小脑颗粒神经元的作用,这一效应是非JNK依赖性的.
[目的] 觀察重新去極化(redepolarization,25mmol/L K+)對原代培養的大鼠小腦顆粒神經元蛋白質c-Jun的影響,對去極化輓救神經元過程中c-Jun的作用及其調節機製進行初步探討.[方法] 用Western blotting檢測原代培養的大鼠小腦顆粒神經元胞內c-Jun總量及燐痠化水平;用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)檢測編碼基因c-jun錶達水平;用免疫共沉澱(coimmunoprecipitation)檢測c-Jun氨基末耑激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)活性;用二乙痠熒光素(fluorescein diacetate, FDA)染色檢測神經元存活率.[結果] 複極化(repolarization, 5 mmol/L K+)使小腦顆粒神經元的c-jun mRNA、c-Jun總量及燐痠化水平迅速增加,神經元存活率隨後明顯下降;複極化2 h後重新去極化,c-jun mRNA、c-Jun總量及燐痠化在2 h內恢複至正常水平,而神經元存活率維持在正常水平;JNK活性在極化轉換前後未改變.[結論] c-Jun的抑製可能介導瞭重新去極化輓救小腦顆粒神經元的作用,這一效應是非JNK依賴性的.
[목적] 관찰중신거겁화(redepolarization,25mmol/L K+)대원대배양적대서소뇌과립신경원단백질c-Jun적영향,대거겁화만구신경원과정중c-Jun적작용급기조절궤제진행초보탐토.[방법] 용Western blotting검측원대배양적대서소뇌과립신경원포내c-Jun총량급린산화수평;용역전록-취합매련반응(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)검측편마기인c-jun표체수평;용면역공침정(coimmunoprecipitation)검측c-Jun안기말단격매(c-Jun N-terminal kinase,JNK)활성;용이을산형광소(fluorescein diacetate, FDA)염색검측신경원존활솔.[결과] 복겁화(repolarization, 5 mmol/L K+)사소뇌과립신경원적c-jun mRNA、c-Jun총량급린산화수평신속증가,신경원존활솔수후명현하강;복겁화2 h후중신거겁화,c-jun mRNA、c-Jun총량급린산화재2 h내회복지정상수평,이신경원존활솔유지재정상수평;JNK활성재겁화전환전후미개변.[결론] c-Jun적억제가능개도료중신거겁화만구소뇌과립신경원적작용,저일효응시비JNK의뢰성적.
