生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2004年
1期
65-66
,共2页
限制性酶切片段差异显示%TaqⅠ酶切%接头%假阳性率
限製性酶切片段差異顯示%TaqⅠ酶切%接頭%假暘性率
한제성매절편단차이현시%TaqⅠ매절%접두%가양성솔
差异显示技术(DD)-PCR是一种研究基因表达差异的重要而应用广泛的方法,传统的差异显示法由于在PCR时采用Poly(T)引物和随机引物而导致较高的假阳性率和产物的近Poly(A)非编码区的大量扩增.改进后的限制性酶切片段差异显示技术(RFDD)-PCR采用TaqⅠ酶切双链cDNA,连上特殊设计的接头,再用经特殊设计的特异性配对于接头的引物来扩增,因此能重点扩增编码区并能极大地消除假阳性率.由于扩增时引物就带有荧光或放射性核素标记,还使得差异显示条带的检测更为方便、灵敏.本文简要介绍了该法的原理、步骤、应用及其优缺点.
差異顯示技術(DD)-PCR是一種研究基因錶達差異的重要而應用廣汎的方法,傳統的差異顯示法由于在PCR時採用Poly(T)引物和隨機引物而導緻較高的假暘性率和產物的近Poly(A)非編碼區的大量擴增.改進後的限製性酶切片段差異顯示技術(RFDD)-PCR採用TaqⅠ酶切雙鏈cDNA,連上特殊設計的接頭,再用經特殊設計的特異性配對于接頭的引物來擴增,因此能重點擴增編碼區併能極大地消除假暘性率.由于擴增時引物就帶有熒光或放射性覈素標記,還使得差異顯示條帶的檢測更為方便、靈敏.本文簡要介紹瞭該法的原理、步驟、應用及其優缺點.
차이현시기술(DD)-PCR시일충연구기인표체차이적중요이응용엄범적방법,전통적차이현시법유우재PCR시채용Poly(T)인물화수궤인물이도치교고적가양성솔화산물적근Poly(A)비편마구적대량확증.개진후적한제성매절편단차이현시기술(RFDD)-PCR채용TaqⅠ매절쌍련cDNA,련상특수설계적접두,재용경특수설계적특이성배대우접두적인물래확증,인차능중점확증편마구병능겁대지소제가양성솔.유우확증시인물취대유형광혹방사성핵소표기,환사득차이현시조대적검측경위방편、령민.본문간요개소료해법적원리、보취、응용급기우결점.