细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2004年
4期
444-448
,共5页
管宝全%张军%罗文新%顾颖%朱子恒%夏宁邵
管寶全%張軍%囉文新%顧穎%硃子恆%夏寧邵
관보전%장군%라문신%고영%주자항%하저소
轻链可变区%GFP%融合蛋白
輕鏈可變區%GFP%融閤蛋白
경련가변구%GFP%융합단백
目的:在大肠杆菌中表达抗HBV中和抗体MA18/7轻链可变区基因(VL)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白,并测定其生物学活性.方法:应用基因工程技术,将EGFP基因克隆到载体pTO-T7中构建原核表达载体.然后将MA18/7的VL基因按照读码框插入到无终止密码子TAA的EGFP基因的5′末端,构建融合蛋白表达载体.通过ELISA和相对荧光强度测定在大肠杆菌中表达的融合蛋白的活性.结果:构建了EGFP-MA18/7-VL表达载体.SDS-PAGE表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在.荧光测定显示,融合蛋白保持了GFP的荧光性质.ELISA的结果表明,融合蛋白与重链可变区(VH)片段结合成的Fv,能特异性地识别HBV pre-SI抗原.结论:成功地获得具有良好生物学活性的融合蛋白,可用于进一步的研究.
目的:在大腸桿菌中錶達抗HBV中和抗體MA18/7輕鏈可變區基因(VL)與增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)的融閤蛋白,併測定其生物學活性.方法:應用基因工程技術,將EGFP基因剋隆到載體pTO-T7中構建原覈錶達載體.然後將MA18/7的VL基因按照讀碼框插入到無終止密碼子TAA的EGFP基因的5′末耑,構建融閤蛋白錶達載體.通過ELISA和相對熒光彊度測定在大腸桿菌中錶達的融閤蛋白的活性.結果:構建瞭EGFP-MA18/7-VL錶達載體.SDS-PAGE錶明,融閤蛋白主要以包涵體的形式存在.熒光測定顯示,融閤蛋白保持瞭GFP的熒光性質.ELISA的結果錶明,融閤蛋白與重鏈可變區(VH)片段結閤成的Fv,能特異性地識彆HBV pre-SI抗原.結論:成功地穫得具有良好生物學活性的融閤蛋白,可用于進一步的研究.
목적:재대장간균중표체항HBV중화항체MA18/7경련가변구기인(VL)여증강형록색형광단백(EGFP)적융합단백,병측정기생물학활성.방법:응용기인공정기술,장EGFP기인극륭도재체pTO-T7중구건원핵표체재체.연후장MA18/7적VL기인안조독마광삽입도무종지밀마자TAA적EGFP기인적5′말단,구건융합단백표체재체.통과ELISA화상대형광강도측정재대장간균중표체적융합단백적활성.결과:구건료EGFP-MA18/7-VL표체재체.SDS-PAGE표명,융합단백주요이포함체적형식존재.형광측정현시,융합단백보지료GFP적형광성질.ELISA적결과표명,융합단백여중련가변구(VH)편단결합성적Fv,능특이성지식별HBV pre-SI항원.결론:성공지획득구유량호생물학활성적융합단백,가용우진일보적연구.
