作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2008年
3期
349-354
,共6页
邢莉萍%王华忠%蒋正宁%倪金龙%曹爱忠%于玲%陈佩度
邢莉萍%王華忠%蔣正寧%倪金龍%曹愛忠%于玲%陳珮度
형리평%왕화충%장정저%예금룡%조애충%우령%진패도
小麦类甜蛋白基因%基因枪%遗传转化%白粉病%抗性鉴定
小麥類甜蛋白基因%基因鎗%遺傳轉化%白粉病%抗性鑒定
소맥류첨단백기인%기인창%유전전화%백분병%항성감정
目前已克隆出许多类甜蛋白基因并成功转化马铃薯、水稻和小麦等植物,均可引起植株抗病性的提高.在以往的研究中我们从小麦中克隆了一个类甜蛋白基因(Ta-Tlp),该基因在高抗白粉病的小麦6VS/6AL易位系中能够高水平表达,推测它与白粉病抗性密切相关.为进一步研究该基因的功能,本研究构建了包含在ubi强启动子控制下的Ta-Tlp基因的表达载体pAHC-T1P,用基因枪将其导入小麦品种扬麦158的幼胚愈伤组织.在含除草剂的选择培养基上经两轮筛选和分化.获得再生抗性植株.对T0、T1和T2代植株进行PCR、Southern杂交与RT-PCR分析,结果表明Ta-Tlp基因已整合进受体基因组并且能够表达.对T0代及其衍生的T1代(来自6个T0代阳性株系的183个单株)和T2代(来自6个T0代阳性株系的241个单株)转化植株进行白粉病抗性鉴定,Ta-Tlp基因超量表达的转基因植株,能延缓白粉病发病进程,其白粉病抗性有一定提高.对T2代阳性转化植株进行赤霉病抗性鉴定表明,其抗性与受体对照相比无显著差异.
目前已剋隆齣許多類甜蛋白基因併成功轉化馬鈴藷、水稻和小麥等植物,均可引起植株抗病性的提高.在以往的研究中我們從小麥中剋隆瞭一箇類甜蛋白基因(Ta-Tlp),該基因在高抗白粉病的小麥6VS/6AL易位繫中能夠高水平錶達,推測它與白粉病抗性密切相關.為進一步研究該基因的功能,本研究構建瞭包含在ubi彊啟動子控製下的Ta-Tlp基因的錶達載體pAHC-T1P,用基因鎗將其導入小麥品種颺麥158的幼胚愈傷組織.在含除草劑的選擇培養基上經兩輪篩選和分化.穫得再生抗性植株.對T0、T1和T2代植株進行PCR、Southern雜交與RT-PCR分析,結果錶明Ta-Tlp基因已整閤進受體基因組併且能夠錶達.對T0代及其衍生的T1代(來自6箇T0代暘性株繫的183箇單株)和T2代(來自6箇T0代暘性株繫的241箇單株)轉化植株進行白粉病抗性鑒定,Ta-Tlp基因超量錶達的轉基因植株,能延緩白粉病髮病進程,其白粉病抗性有一定提高.對T2代暘性轉化植株進行赤黴病抗性鑒定錶明,其抗性與受體對照相比無顯著差異.
목전이극륭출허다류첨단백기인병성공전화마령서、수도화소맥등식물,균가인기식주항병성적제고.재이왕적연구중아문종소맥중극륭료일개류첨단백기인(Ta-Tlp),해기인재고항백분병적소맥6VS/6AL역위계중능구고수평표체,추측타여백분병항성밀절상관.위진일보연구해기인적공능,본연구구건료포함재ubi강계동자공제하적Ta-Tlp기인적표체재체pAHC-T1P,용기인창장기도입소맥품충양맥158적유배유상조직.재함제초제적선택배양기상경량륜사선화분화.획득재생항성식주.대T0、T1화T2대식주진행PCR、Southern잡교여RT-PCR분석,결과표명Ta-Tlp기인이정합진수체기인조병차능구표체.대T0대급기연생적T1대(래자6개T0대양성주계적183개단주)화T2대(래자6개T0대양성주계적241개단주)전화식주진행백분병항성감정,Ta-Tlp기인초량표체적전기인식주,능연완백분병발병진정,기백분병항성유일정제고.대T2대양성전화식주진행적매병항성감정표명,기항성여수체대조상비무현저차이.
