复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2010年
5期
526-530,543
,共6页
陈彤%姜桦%丰有吉%张国平%林晓龙%龚文佳%陈秋雷%魏勋斌
陳彤%薑樺%豐有吉%張國平%林曉龍%龔文佳%陳鞦雷%魏勛斌
진동%강화%봉유길%장국평%림효룡%공문가%진추뢰%위훈빈
侧群细胞%肿瘤干细胞%示踪
側群細胞%腫瘤榦細胞%示蹤
측군세포%종류간세포%시종
目的 通过慢病毒将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因转入卵巢癌细胞中,研究慢病毒感染对细胞泵出Hoechst 33342能力的影响,追踪GFP(+)侧群(side population,SP)细胞在裸鼠体内的荧光表达和肿瘤成像.方法 选用人卵巢癌细胞株HO-8910PM,以慢病毒感染GFP基因至人卵巢癌细胞株HO-8910PM,摸索以Ubiquitin启动子构建的慢病毒颗粒对该细胞的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI).以流式细胞仪分选表达GFP的卵巢癌细胞株,获得高纯度的GFP(+)HO-8910PM,检测GFP表达对Hoechst 33342染色的影响.再以流式细胞仪分选GFP(+)SP细胞,将分选的GFP(+)SP细胞注射入裸鼠皮下,观察GFP(+)SP细胞的致瘤能力,并在体内观测GFP(+)SP来源肿瘤的荧光成像.结果 Ubiquitin启动子构建的慢病毒感染不影响卵巢癌细胞拒染Hoechst 33342的能力,分选的GFP(+)SP细胞仍能在裸鼠体内形成表达GFP的肿瘤,成瘤能力和未感染细胞相比无显著变化,GFP阳性肿瘤在成像系统中可见荧光表达.结论 慢病毒感染不影响卵巢癌细胞拒染Hoechst 33342的能力,慢病毒感染后分选的GFP(+)SP细胞仍能在裸鼠体内形成表达GFP的肿瘤,成瘤能力和未感染细胞相比无显著变化,GFP标记可以作为研究卵巢癌细胞在动物活体内生物学行为的示踪标记.
目的 通過慢病毒將綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因轉入卵巢癌細胞中,研究慢病毒感染對細胞泵齣Hoechst 33342能力的影響,追蹤GFP(+)側群(side population,SP)細胞在裸鼠體內的熒光錶達和腫瘤成像.方法 選用人卵巢癌細胞株HO-8910PM,以慢病毒感染GFP基因至人卵巢癌細胞株HO-8910PM,摸索以Ubiquitin啟動子構建的慢病毒顆粒對該細胞的最佳感染複數(multiplicity of infection,MOI).以流式細胞儀分選錶達GFP的卵巢癌細胞株,穫得高純度的GFP(+)HO-8910PM,檢測GFP錶達對Hoechst 33342染色的影響.再以流式細胞儀分選GFP(+)SP細胞,將分選的GFP(+)SP細胞註射入裸鼠皮下,觀察GFP(+)SP細胞的緻瘤能力,併在體內觀測GFP(+)SP來源腫瘤的熒光成像.結果 Ubiquitin啟動子構建的慢病毒感染不影響卵巢癌細胞拒染Hoechst 33342的能力,分選的GFP(+)SP細胞仍能在裸鼠體內形成錶達GFP的腫瘤,成瘤能力和未感染細胞相比無顯著變化,GFP暘性腫瘤在成像繫統中可見熒光錶達.結論 慢病毒感染不影響卵巢癌細胞拒染Hoechst 33342的能力,慢病毒感染後分選的GFP(+)SP細胞仍能在裸鼠體內形成錶達GFP的腫瘤,成瘤能力和未感染細胞相比無顯著變化,GFP標記可以作為研究卵巢癌細胞在動物活體內生物學行為的示蹤標記.
목적 통과만병독장록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)기인전입란소암세포중,연구만병독감염대세포빙출Hoechst 33342능력적영향,추종GFP(+)측군(side population,SP)세포재라서체내적형광표체화종류성상.방법 선용인란소암세포주HO-8910PM,이만병독감염GFP기인지인란소암세포주HO-8910PM,모색이Ubiquitin계동자구건적만병독과립대해세포적최가감염복수(multiplicity of infection,MOI).이류식세포의분선표체GFP적란소암세포주,획득고순도적GFP(+)HO-8910PM,검측GFP표체대Hoechst 33342염색적영향.재이류식세포의분선GFP(+)SP세포,장분선적GFP(+)SP세포주사입라서피하,관찰GFP(+)SP세포적치류능력,병재체내관측GFP(+)SP래원종류적형광성상.결과 Ubiquitin계동자구건적만병독감염불영향란소암세포거염Hoechst 33342적능력,분선적GFP(+)SP세포잉능재라서체내형성표체GFP적종류,성류능력화미감염세포상비무현저변화,GFP양성종류재성상계통중가견형광표체.결론 만병독감염불영향란소암세포거염Hoechst 33342적능력,만병독감염후분선적GFP(+)SP세포잉능재라서체내형성표체GFP적종류,성류능력화미감염세포상비무현저변화,GFP표기가이작위연구란소암세포재동물활체내생물학행위적시종표기.
