生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
3期
415-418
,共4页
张宏刚%陈苏红%张敏丽%赵素莲%王升启
張宏剛%陳囌紅%張敏麗%趙素蓮%王升啟
장굉강%진소홍%장민려%조소련%왕승계
土拉弗朗西斯菌%免疫渗滤法%金标银染
土拉弗朗西斯菌%免疫滲濾法%金標銀染
토랍불랑서사균%면역삼려법%금표은염
目的:建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的方法,评价其灵敏度、特异性、重复性及其应用.方法:以小鼠抗土拉菌脂多糖单克隆抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜、兔抗土拉菌多克隆抗体作为检测抗体标记胶体金,通过金标银染技术放大检测信号,建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌体系;评价该方法的灵敏度、特异性和重复性;以经荧光定量PCR定量的土拉弗朗西斯菌为检测对象,比较金标银染免疫渗滤法和免疫层析法.结果:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌的最小检出量为1.0×103 CFU/mL,灵敏度高于免疫层析法;检测大肠杆菌、炭疽芽孢杆菌、布鲁菌和鼠疫耶尔森菌的结果均为阴性;密封保存的检测卡80 d内重复性良好,100 d后反应强度略有降低.结论:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌敏感性高、特异性强、重复性好,且方便快捷,不需要仪器设备,可作为快速检测土拉弗朗西斯菌的首选方法.
目的:建立金標銀染免疫滲濾法檢測土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的方法,評價其靈敏度、特異性、重複性及其應用.方法:以小鼠抗土拉菌脂多糖單剋隆抗體作為捕穫抗體包被硝痠纖維素膜、兔抗土拉菌多剋隆抗體作為檢測抗體標記膠體金,通過金標銀染技術放大檢測信號,建立金標銀染免疫滲濾法檢測土拉弗朗西斯菌體繫;評價該方法的靈敏度、特異性和重複性;以經熒光定量PCR定量的土拉弗朗西斯菌為檢測對象,比較金標銀染免疫滲濾法和免疫層析法.結果:金標銀染免疫滲濾法檢測土拉弗朗西斯菌的最小檢齣量為1.0×103 CFU/mL,靈敏度高于免疫層析法;檢測大腸桿菌、炭疽芽孢桿菌、佈魯菌和鼠疫耶爾森菌的結果均為陰性;密封保存的檢測卡80 d內重複性良好,100 d後反應彊度略有降低.結論:金標銀染免疫滲濾法檢測土拉弗朗西斯菌敏感性高、特異性彊、重複性好,且方便快捷,不需要儀器設備,可作為快速檢測土拉弗朗西斯菌的首選方法.
목적:건립금표은염면역삼려법검측토랍불랑서사균(토랍균)적방법,평개기령민도、특이성、중복성급기응용.방법:이소서항토랍균지다당단극륭항체작위포획항체포피초산섬유소막、토항토랍균다극륭항체작위검측항체표기효체금,통과금표은염기술방대검측신호,건립금표은염면역삼려법검측토랍불랑서사균체계;평개해방법적령민도、특이성화중복성;이경형광정량PCR정량적토랍불랑서사균위검측대상,비교금표은염면역삼려법화면역층석법.결과:금표은염면역삼려법검측토랍불랑서사균적최소검출량위1.0×103 CFU/mL,령민도고우면역층석법;검측대장간균、탄저아포간균、포로균화서역야이삼균적결과균위음성;밀봉보존적검측잡80 d내중복성량호,100 d후반응강도략유강저.결론:금표은염면역삼려법검측토랍불랑서사균민감성고、특이성강、중복성호,차방편쾌첩,불수요의기설비,가작위쾌속검측토랍불랑서사균적수선방법.