东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2012年
1期
40-43
,共4页
程林%宋红勇%吴喜林%吴稚伟
程林%宋紅勇%吳喜林%吳稚偉
정림%송홍용%오희림%오치위
CCR5基因%质粒%真核表达%人类免疫缺陷病毒
CCR5基因%質粒%真覈錶達%人類免疫缺陷病毒
CCR5기인%질립%진핵표체%인류면역결함병독
目的:构建人CCR5基因的真核表达质粒并对其进行功能鉴定.方法:PCR扩增人CCR5基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1内,构建含人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5.使用RT-PCR、流式细胞术和HIV假病毒感染实验的方法,鉴定CCR5在真核细胞中的表达和功能.结果:克隆的人CCR5基因与GenBank中已登记的基因序列100%同源.瞬时转染真核细胞后,RT-PCR在预期的位置检测出目的条带,流式细胞术检测到约25.6%的细胞表达CCR5蛋白,且该蛋白能介导HIV假病毒的感染.结论:成功构建了含人CCR5基因的真核表达质粒.
目的:構建人CCR5基因的真覈錶達質粒併對其進行功能鑒定.方法:PCR擴增人CCR5基因,將其剋隆入真覈錶達載體pcDNA3.1內,構建含人CCR5基因的真覈錶達質粒pcDNA3.1-CCR5.使用RT-PCR、流式細胞術和HIV假病毒感染實驗的方法,鑒定CCR5在真覈細胞中的錶達和功能.結果:剋隆的人CCR5基因與GenBank中已登記的基因序列100%同源.瞬時轉染真覈細胞後,RT-PCR在預期的位置檢測齣目的條帶,流式細胞術檢測到約25.6%的細胞錶達CCR5蛋白,且該蛋白能介導HIV假病毒的感染.結論:成功構建瞭含人CCR5基因的真覈錶達質粒.
목적:구건인CCR5기인적진핵표체질립병대기진행공능감정.방법:PCR확증인CCR5기인,장기극륭입진핵표체재체pcDNA3.1내,구건함인CCR5기인적진핵표체질립pcDNA3.1-CCR5.사용RT-PCR、류식세포술화HIV가병독감염실험적방법,감정CCR5재진핵세포중적표체화공능.결과:극륭적인CCR5기인여GenBank중이등기적기인서렬100%동원.순시전염진핵세포후,RT-PCR재예기적위치검측출목적조대,류식세포술검측도약25.6%적세포표체CCR5단백,차해단백능개도HIV가병독적감염.결론:성공구건료함인CCR5기인적진핵표체질립.
