广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
17期
2545-2547
,共3页
周娲%秦晓华%李瑾%黄翀%邹宏昌%金国华%房向东%涂卫平
週媧%秦曉華%李瑾%黃翀%鄒宏昌%金國華%房嚮東%塗衛平
주왜%진효화%리근%황충%추굉창%금국화%방향동%도위평
红细胞生成素%白蛋白%肾小管上皮细胞%转分化
紅細胞生成素%白蛋白%腎小管上皮細胞%轉分化
홍세포생성소%백단백%신소관상피세포%전분화
目的 探讨红细胞生成素(EPO)对人白蛋白诱导的正常人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化的作用.方法 将体外培养的HK-2细胞随机分为空白对照组(未加任何刺激物)、EPO诱导组(EPO终浓度为20 U/mL)、白蛋白诱导组(白蛋白终浓度5 mg/mL)、EPO干预组(EPO终浓度分别为5、10、20 U/mL)及转化生长因子β1(TGF-β1)拮抗剂组(SB431542终浓度为10 μmol/L,加入SB431542 30 min后加白蛋白,白蛋白终浓度为5 mg/mL),各组均刺激24 h.应用RT-PCR法检测细胞TGF-β1 mRNA的水平;细胞免疫荧光法检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达;ELISA法检测上清液纤维连结蛋白(FN)的蛋白表达.结果 RT-PCR结果 表明白蛋白诱导组TGF-β1 mRNA较空白对照组显著升高(P<0.05),给予EPO干预后TGF-β1 mRNA显著下调(P<0.05);细胞免疫荧光及ELISA结果 显示白蛋白诱导组E-cadherin的蛋白表达较空白对照组显著下降,α-SMA、FN的蛋白表达显著上升(P<0.05),而在EPO干预组及TGF-β1拮抗剂组E-cadherin的蛋白表达较白蛋白诱导组显著上调,α-SMA、FN的蛋白表达显著下调(P<0.05),且与EPO的浓度有关.结论 EPO可抑制白蛋白诱导的HK-2细胞的转分化,从而延缓肾间质纤维化,其机制可能与阻断TGF-β1的作用有关.
目的 探討紅細胞生成素(EPO)對人白蛋白誘導的正常人近耑腎小管上皮細胞(HK-2細胞)轉分化的作用.方法 將體外培養的HK-2細胞隨機分為空白對照組(未加任何刺激物)、EPO誘導組(EPO終濃度為20 U/mL)、白蛋白誘導組(白蛋白終濃度5 mg/mL)、EPO榦預組(EPO終濃度分彆為5、10、20 U/mL)及轉化生長因子β1(TGF-β1)拮抗劑組(SB431542終濃度為10 μmol/L,加入SB431542 30 min後加白蛋白,白蛋白終濃度為5 mg/mL),各組均刺激24 h.應用RT-PCR法檢測細胞TGF-β1 mRNA的水平;細胞免疫熒光法檢測細胞E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的蛋白錶達;ELISA法檢測上清液纖維連結蛋白(FN)的蛋白錶達.結果 RT-PCR結果 錶明白蛋白誘導組TGF-β1 mRNA較空白對照組顯著升高(P<0.05),給予EPO榦預後TGF-β1 mRNA顯著下調(P<0.05);細胞免疫熒光及ELISA結果 顯示白蛋白誘導組E-cadherin的蛋白錶達較空白對照組顯著下降,α-SMA、FN的蛋白錶達顯著上升(P<0.05),而在EPO榦預組及TGF-β1拮抗劑組E-cadherin的蛋白錶達較白蛋白誘導組顯著上調,α-SMA、FN的蛋白錶達顯著下調(P<0.05),且與EPO的濃度有關.結論 EPO可抑製白蛋白誘導的HK-2細胞的轉分化,從而延緩腎間質纖維化,其機製可能與阻斷TGF-β1的作用有關.
목적 탐토홍세포생성소(EPO)대인백단백유도적정상인근단신소관상피세포(HK-2세포)전분화적작용.방법 장체외배양적HK-2세포수궤분위공백대조조(미가임하자격물)、EPO유도조(EPO종농도위20 U/mL)、백단백유도조(백단백종농도5 mg/mL)、EPO간예조(EPO종농도분별위5、10、20 U/mL)급전화생장인자β1(TGF-β1)길항제조(SB431542종농도위10 μmol/L,가입SB431542 30 min후가백단백,백단백종농도위5 mg/mL),각조균자격24 h.응용RT-PCR법검측세포TGF-β1 mRNA적수평;세포면역형광법검측세포E-개점단백(E-cadherin)、α-평활기기동단백(α-SMA)적단백표체;ELISA법검측상청액섬유련결단백(FN)적단백표체.결과 RT-PCR결과 표명백단백유도조TGF-β1 mRNA교공백대조조현저승고(P<0.05),급여EPO간예후TGF-β1 mRNA현저하조(P<0.05);세포면역형광급ELISA결과 현시백단백유도조E-cadherin적단백표체교공백대조조현저하강,α-SMA、FN적단백표체현저상승(P<0.05),이재EPO간예조급TGF-β1길항제조E-cadherin적단백표체교백단백유도조현저상조,α-SMA、FN적단백표체현저하조(P<0.05),차여EPO적농도유관.결론 EPO가억제백단백유도적HK-2세포적전분화,종이연완신간질섬유화,기궤제가능여조단TGF-β1적작용유관.
