西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2012年
6期
6-12
,共7页
时乐%黄勇%许信刚%童德文
時樂%黃勇%許信剛%童德文
시악%황용%허신강%동덕문
猪细小病毒%NSI基因%VP2基因%序列分析%原核表达
豬細小病毒%NSI基因%VP2基因%序列分析%原覈錶達
저세소병독%NSI기인%VP2기인%서렬분석%원핵표체
为对猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)进行分子生物学研究,将该病毒YL株基因组分为4个重叠片段进行PCR扩增,并将扩增产物克隆到pGEM-T载体中,测定病毒基因组全长序列.另外,应用其中1对引物,通过PCR方法扩增出一段包含VP2主要抗原区域的片段,构建重组质粒pET-VP2,IPTG诱导表达.序列分析结果表明,PPV YL株和国内外PPV分离毒株NSI基因核苷酸同源性为97.8％～99.4％,氨基酸同源性为96.7％～99.5％,与国内外主要毒株VP2基因核苷酸司源性为98.7％～99.7％,氨基酸同源性为97.4％～99.8％.进化树分析表明,PPV YL株与BQ株(EU790641)毒株处在同一分支上,遗传距离最近.SDS-PAGE结果显示,表达产物分子质量为56 ku,经Western blotting检测具有生物学活性.
為對豬細小病毒(porcine parvovirus,PPV)進行分子生物學研究,將該病毒YL株基因組分為4箇重疊片段進行PCR擴增,併將擴增產物剋隆到pGEM-T載體中,測定病毒基因組全長序列.另外,應用其中1對引物,通過PCR方法擴增齣一段包含VP2主要抗原區域的片段,構建重組質粒pET-VP2,IPTG誘導錶達.序列分析結果錶明,PPV YL株和國內外PPV分離毒株NSI基因覈苷痠同源性為97.8％～99.4％,氨基痠同源性為96.7％～99.5％,與國內外主要毒株VP2基因覈苷痠司源性為98.7％～99.7％,氨基痠同源性為97.4％～99.8％.進化樹分析錶明,PPV YL株與BQ株(EU790641)毒株處在同一分支上,遺傳距離最近.SDS-PAGE結果顯示,錶達產物分子質量為56 ku,經Western blotting檢測具有生物學活性.
위대저세소병독(porcine parvovirus,PPV)진행분자생물학연구,장해병독YL주기인조분위4개중첩편단진행PCR확증,병장확증산물극륭도pGEM-T재체중,측정병독기인조전장서렬.령외,응용기중1대인물,통과PCR방법확증출일단포함VP2주요항원구역적편단,구건중조질립pET-VP2,IPTG유도표체.서렬분석결과표명,PPV YL주화국내외PPV분리독주NSI기인핵감산동원성위97.8％～99.4％,안기산동원성위96.7％～99.5％,여국내외주요독주VP2기인핵감산사원성위98.7％～99.7％,안기산동원성위97.4％～99.8％.진화수분석표명,PPV YL주여BQ주(EU790641)독주처재동일분지상,유전거리최근.SDS-PAGE결과현시,표체산물분자질량위56 ku,경Western blotting검측구유생물학활성.
