广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2005年
4期
275-282
,共8页
吴晓松%商巾杰%范云燕%蒋莹%姚姿婷%陈辉%陈保善
吳曉鬆%商巾傑%範雲燕%蔣瑩%姚姿婷%陳輝%陳保善
오효송%상건걸%범운연%장형%요자정%진휘%진보선
低毒病毒/板栗疫病菌%cDNA文库%高丰度克隆%原位杂交
低毒病毒/闆慄疫病菌%cDNA文庫%高豐度剋隆%原位雜交
저독병독/판률역병균%cDNA문고%고봉도극륭%원위잡교
低毒病毒/板栗疫病菌是一个研究病毒宿主相互作用的优良的实验系统.为了更好的了解病毒与宿主相互作用的机制,我们建立了一个野生型无病毒板栗疫病菌菌株EP155和受低毒病毒感染的菌株EP713的cDNA混和文库,以进行表达序列标签(EST)测定.对543个克隆的外源片段的分析表明,该文库克隆中含外源片段的比例为89.8%;通过小规模测序,发现空质粒与小片段克隆占测序总数的10.1%;表达丰度最高的4个克隆出现次数的总和占测序总数的9.6%.通过设计引物进行PCR和原位杂交,对cDNA文库2万多个克隆进行了筛选,共筛除了占总数19.7%的空质粒与小克隆和5.5%的高丰度克隆,为高效率的大规模EST测序准备了条件.
低毒病毒/闆慄疫病菌是一箇研究病毒宿主相互作用的優良的實驗繫統.為瞭更好的瞭解病毒與宿主相互作用的機製,我們建立瞭一箇野生型無病毒闆慄疫病菌菌株EP155和受低毒病毒感染的菌株EP713的cDNA混和文庫,以進行錶達序列標籤(EST)測定.對543箇剋隆的外源片段的分析錶明,該文庫剋隆中含外源片段的比例為89.8%;通過小規模測序,髮現空質粒與小片段剋隆佔測序總數的10.1%;錶達豐度最高的4箇剋隆齣現次數的總和佔測序總數的9.6%.通過設計引物進行PCR和原位雜交,對cDNA文庫2萬多箇剋隆進行瞭篩選,共篩除瞭佔總數19.7%的空質粒與小剋隆和5.5%的高豐度剋隆,為高效率的大規模EST測序準備瞭條件.
저독병독/판률역병균시일개연구병독숙주상호작용적우량적실험계통.위료경호적료해병독여숙주상호작용적궤제,아문건립료일개야생형무병독판률역병균균주EP155화수저독병독감염적균주EP713적cDNA혼화문고,이진행표체서렬표첨(EST)측정.대543개극륭적외원편단적분석표명,해문고극륭중함외원편단적비례위89.8%;통과소규모측서,발현공질립여소편단극륭점측서총수적10.1%;표체봉도최고적4개극륭출현차수적총화점측서총수적9.6%.통과설계인물진행PCR화원위잡교,대cDNA문고2만다개극륭진행료사선,공사제료점총수19.7%적공질립여소극륭화5.5%적고봉도극륭,위고효솔적대규모EST측서준비료조건.
