CAJ | 학술논문

目的应用荧光染料CFDA-SE (Carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester)染色检测氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠淋巴细胞增殖的影响.方法利用CFDA-SE染色,流式细胞术检测小鼠T淋巴细胞在多克隆刺激剂Con A和OMT的共同作同下荧光强度的变化,并应用相关软件分析OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响程度.结果培养48h,流式细胞仪检测的淋巴细胞CFSE荧光强度,对照组未出现子代峰,即淋巴细胞没有增殖.Con A组明显的出现3个峰,说明Con A刺激后48h细胞出现了明显的细胞增殖,与对照组相比荧光强度减半明显.在Con A+OMT各剂量组中,高剂量组即OMT500μg/mL组,原代峰显著高于Con A组,各子代峰显著低于Con A组,但与对照组比较差异无显著性,说明OMT明显抑制了淋巴细胞的增殖,中剂量组即OMT125μg/mL组和高剂量组结果一致,说明这一剂量的OMT仍然明显抑制小鼠淋巴细胞的增值,OMT低剂量组即OMT31μg/mL组和Con A组比较差异没有显著性,和对照组比较,各代细胞荧光强度差异有显著性,即这一剂量的OMT对淋巴细胞增殖抑制作用不明显.培养72 h后,各组之间荧光强度变化情况与48h的情况基本一致.经CELLQuest软件拟合后得到各项增殖指标显示,OMT在500μg/mL、125μg/mL和31μg/mL组呈剂量依赖地抑制Con A对淋巴细胞促增殖作用.结论 CFDA-SE染色和流式细胞术是分析淋巴细胞增殖的有力工具.OMT在500、125和31μg/mL呈剂量依赖地抑制淋巴细胞的增殖,即OMT对小鼠淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用.
목적응용형광염료CFDA-SE (Carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester)염색검측양화고삼감(Oxymatrine,OMT)대도두단백A(Con A)자격적소서림파세포증식적영향.방법이용CFDA-SE염색,류식세포술검측소서T림파세포재다극륭자격제Con A화OMT적공동작동하형광강도적변화,병응용상관연건분석OMT대소서림파세포증식적영향정도.결과배양48h,류식세포의검측적림파세포CFSE형광강도,대조조미출현자대봉,즉림파세포몰유증식.Con A조명현적출현3개봉,설명Con A자격후48h세포출현료명현적세포증식,여대조조상비형광강도감반명현.재Con A+OMT각제량조중,고제량조즉OMT500μg/mL조,원대봉현저고우Con A조,각자대봉현저저우Con A조,단여대조조비교차이무현저성,설명OMT명현억제료림파세포적증식,중제량조즉OMT125μg/mL조화고제량조결과일치,설명저일제량적OMT잉연명현억제소서림파세포적증치,OMT저제량조즉OMT31μg/mL조화Con A조비교차이몰유현저성,화대조조비교,각대세포형광강도차이유현저성,즉저일제량적OMT대림파세포증식억제작용불명현.배양72 h후,각조지간형광강도변화정황여48h적정황기본일치.경CELLQuest연건의합후득도각항증식지표현시,OMT재500μg/mL、125μg/mL화31μg/mL조정제량의뢰지억제Con A대림파세포촉증식작용.결론 CFDA-SE염색화류식세포술시분석림파세포증식적유력공구.OMT재500、125화31μg/mL정제량의뢰지억제림파세포적증식,즉OMT대소서림파세포증식구유명현적억제작용.