CAJ | 학술논문

目的研究双苯氟嗪(dipfluzine, Dip)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFB)增殖和胶原合成的影响,并探讨其抑制心肌纤维化的机制.方法用消化法培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型.采用MTT法检测Dip对CFB增殖的影响;羟脯氨酸测定检测CFB 胶原含量;流式细胞分析仪技术检测细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达;RT-PCR检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)的基因表达;免疫组织化学染色方法,观察心肌成纤维细胞经典型蛋白激酶C α亚型 (cPKCα) 和细胞外信号调节蛋白激酶 (ERK1) 蛋白的表达.结果①在一定浓度范围内,Dip能明显抑制AngⅡ诱导CFB的增殖和胶原合成(P<0.05或P<0.01).②CFB细胞 G0/G1期百分率随Dip浓度增加而增加,S期、G2/M期百分率和增殖指数随Dip浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01).③Dip能降低PCNA蛋白表达,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.01).④Dip能够明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原和TGF-β1 mRNA的表达(P<0.05或P<0.01).⑤免疫组化结果显示Dip (10、100 μ mol*L-1)组ERK1和cPKCα阳性表达低于AngⅡ组(P<0.05或P<0.01).结论 Dip通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原的增加而起到了抗心肌纤维化的作用,其抗纤维化作用与其降低TGF-β1基因表达以及抑制cPKCα、ERK1通路有关.
목적연구쌍분불진(dipfluzine, Dip)대혈관긴장소Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)유도적신생대서심기성섬유세포(cardiac fibroblasts, CFB)증식화효원합성적영향,병탐토기억제심기섬유화적궤제.방법용소화법배양신생SD대서CFB,건립AngⅡ유도신생대서CFB섬유화모형.채용MTT법검측Dip대CFB증식적영향;간포안산측정검측CFB 효원함량;류식세포분석의기술검측세포주기급증식세포핵항원(PCNA)단백표체;RT-PCR검측Ⅰ형、Ⅲ형효원단백화전화생장인자β1(TGF-β1)적기인표체;면역조직화학염색방법,관찰심기성섬유세포경전형단백격매C α아형 (cPKCα) 화세포외신호조절단백격매 (ERK1) 단백적표체.결과①재일정농도범위내,Dip능명현억제AngⅡ유도CFB적증식화효원합성(P<0.05혹P<0.01).②CFB세포 G0/G1기백분솔수Dip농도증가이증가,S기、G2/M기백분솔화증식지수수Dip농도증가이감소,여AngⅡ조상비차이유현저성(P<0.05혹P<0.01).③Dip능강저PCNA단백표체,여AngⅡ조상비차이유현저성(P<0.01).④Dip능구명현강저Ⅰ형、Ⅲ형효원화TGF-β1 mRNA적표체(P<0.05혹P<0.01).⑤면역조화결과현시Dip (10、100 μ mol*L-1)조ERK1화cPKCα양성표체저우AngⅡ조(P<0.05혹P<0.01).결론 Dip통과억제AngⅡ유도적CFB증식화효원적증가이기도료항심기섬유화적작용,기항섬유화작용여기강저TGF-β1기인표체이급억제cPKCα、ERK1통로유관.