CAJ | 학술논문

目的:探讨脑源性神经生长因子是否能促进脑梗死后小鼠内源性神经干细胞的活跃,能否刺激其分化成神经元.方法:实验于2004-07/2005-02在墨尔本大学完成.选取10周龄纯种C57BL/6J小鼠24只,分为盐水对照组、脑源性神经生长因子治疗组,每组雌雄各6只.①两组均采用结扎左侧大脑中动脉远心端法建立脑梗死模型,同时采用Matsushita描述的方法监测大脑中动脉供血区的血流量,血流量降低至少75%为有效.②脑源性神经生长因子治疗组于梗死后24 h给予脑起源神经营养因子治疗,用药方式采用ALZET锇药物泵缓慢释放.将500μg/kg脑起源神经营养因子溶解于生理盐水中,加入到ALZET泵中,可在28 d内持续缓慢释放药物.盐水对照组于梗死后24 b给予等量生理盐水.③造模前后对两组小鼠运动功能进行Rotarod测试,记录小鼠在Rotarod上的停留时间.采用双重免疫荧光组化及共焦计数系统检测方法,对两组小鼠内源性神经干细胞的数量、密度及其分化方向进行评估. 结果:①运动功能测试结果:与梗死前比较,两组小鼠在梗死后第1周均表现出明显的运动功能下降.但梗死后第2,3,4周,脑起源神经营养因子治疗组小鼠在Rotarod上的停留时间延长,运动功能的恢复明显优于盐水对照组,差异有显著性意义(P＜0.01).②组织切片双重免疫荧光染色结果:两组小鼠脑内均出现免疫荧光阳性表达的内源性神经干细胞,主要分布在病灶周围,在损伤侧的对侧也出现表达.脑起源神经营养因子治疗组的表达数量明显高于盐水对照组.③内源性神经干细胞的激活情况:梗死4周后,两组小鼠脑内都出现内源性神经干细胞的再表达,脑起源神经营养因子治疗组内源性神经干细胞数较盐水对照组明显增加,约4.2倍.同时脑起源神经营养因子治疗组分化为神经元的比例明显高于盐水对照组(36%,15%),分化为星形胶质细胞的比例低于盐水对照组(54%,77%),分化为少突胶质细胞的比例二者基本相似(10%,8%).结论:脑起源神经营养因子可能是基于内源性神经干细胞治疗脑卒中的一种有效的方法通过调控内源性神经干细胞的增殖分化来治疗神经系统疾病在未来将是一种新的干细胞治疗方法. 目的:探討腦源性神經生長因子是否能促進腦梗死後小鼠內源性神經榦細胞的活躍,能否刺激其分化成神經元.方法:實驗于2004-07/2005-02在墨爾本大學完成.選取10週齡純種C57BL/6J小鼠24隻,分為鹽水對照組、腦源性神經生長因子治療組,每組雌雄各6隻.①兩組均採用結扎左側大腦中動脈遠心耑法建立腦梗死模型,同時採用Matsushita描述的方法鑑測大腦中動脈供血區的血流量,血流量降低至少75%為有效.②腦源性神經生長因子治療組于梗死後24 h給予腦起源神經營養因子治療,用藥方式採用ALZET鋨藥物泵緩慢釋放.將500μg/kg腦起源神經營養因子溶解于生理鹽水中,加入到ALZET泵中,可在28 d內持續緩慢釋放藥物.鹽水對照組于梗死後24 b給予等量生理鹽水.③造模前後對兩組小鼠運動功能進行Rotarod測試,記錄小鼠在Rotarod上的停留時間.採用雙重免疫熒光組化及共焦計數繫統檢測方法,對兩組小鼠內源性神經榦細胞的數量、密度及其分化方嚮進行評估. 結果:①運動功能測試結果:與梗死前比較,兩組小鼠在梗死後第1週均錶現齣明顯的運動功能下降.但梗死後第2,3,4週,腦起源神經營養因子治療組小鼠在Rotarod上的停留時間延長,運動功能的恢複明顯優于鹽水對照組,差異有顯著性意義(P＜0.01).②組織切片雙重免疫熒光染色結果:兩組小鼠腦內均齣現免疫熒光暘性錶達的內源性神經榦細胞,主要分佈在病竈週圍,在損傷側的對側也齣現錶達.腦起源神經營養因子治療組的錶達數量明顯高于鹽水對照組.③內源性神經榦細胞的激活情況:梗死4週後,兩組小鼠腦內都齣現內源性神經榦細胞的再錶達,腦起源神經營養因子治療組內源性神經榦細胞數較鹽水對照組明顯增加,約4.2倍.同時腦起源神經營養因子治療組分化為神經元的比例明顯高于鹽水對照組(36%,15%),分化為星形膠質細胞的比例低于鹽水對照組(54%,77%),分化為少突膠質細胞的比例二者基本相似(10%,8%).結論:腦起源神經營養因子可能是基于內源性神經榦細胞治療腦卒中的一種有效的方法通過調控內源性神經榦細胞的增殖分化來治療神經繫統疾病在未來將是一種新的榦細胞治療方法.
목적:탐토뇌원성신경생장인자시부능촉진뇌경사후소서내원성신경간세포적활약,능부자격기분화성신경원.방법:실험우2004-07/2005-02재묵이본대학완성.선취10주령순충C57BL/6J소서24지,분위염수대조조、뇌원성신경생장인자치료조,매조자웅각6지.①량조균채용결찰좌측대뇌중동맥원심단법건립뇌경사모형,동시채용Matsushita묘술적방법감측대뇌중동맥공혈구적혈류량,혈류량강저지소75%위유효.②뇌원성신경생장인자치료조우경사후24 h급여뇌기원신경영양인자치료,용약방식채용ALZET철약물빙완만석방.장500μg/kg뇌기원신경영양인자용해우생리염수중,가입도ALZET빙중,가재28 d내지속완만석방약물.염수대조조우경사후24 b급여등량생리염수.③조모전후대량조소서운동공능진행Rotarod측시,기록소서재Rotarod상적정류시간.채용쌍중면역형광조화급공초계수계통검측방법,대량조소서내원성신경간세포적수량、밀도급기분화방향진행평고. 결과:①운동공능측시결과:여경사전비교,량조소서재경사후제1주균표현출명현적운동공능하강.단경사후제2,3,4주,뇌기원신경영양인자치료조소서재Rotarod상적정류시간연장,운동공능적회복명현우우염수대조조,차이유현저성의의(P＜0.01).②조직절편쌍중면역형광염색결과:량조소서뇌내균출현면역형광양성표체적내원성신경간세포,주요분포재병조주위,재손상측적대측야출현표체.뇌기원신경영양인자치료조적표체수량명현고우염수대조조.③내원성신경간세포적격활정황:경사4주후,량조소서뇌내도출현내원성신경간세포적재표체,뇌기원신경영양인자치료조내원성신경간세포수교염수대조조명현증가,약4.2배.동시뇌기원신경영양인자치료조분화위신경원적비례명현고우염수대조조(36%,15%),분화위성형효질세포적비례저우염수대조조(54%,77%),분화위소돌효질세포적비례이자기본상사(10%,8%).결론:뇌기원신경영양인자가능시기우내원성신경간세포치료뇌졸중적일충유효적방법통과조공내원성신경간세포적증식분화래치료신경계통질병재미래장시일충신적간세포치료방법.