中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2007年
9期
1747-1751
,共5页
张绪超%陈惠芹%黄绍良%吴北燕%黄永兰%蔡耘
張緒超%陳惠芹%黃紹良%吳北燕%黃永蘭%蔡耘
장서초%진혜근%황소량%오북연%황영란%채운
胚胎干细胞%造血干细胞%细胞分化
胚胎榦細胞%造血榦細胞%細胞分化
배태간세포%조혈간세포%세포분화
目的:体外模拟胚胎早期AGM区造血微环境,诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为造血干细胞(HSCs).方法:将小鼠E14 ESCs在含BMP-4及VEGF的半固体培养基中诱导为拟胚体(EB),分别于3、6、9、12、15 d时收获EB,流式细胞术检测Flk-1+细胞含量.取Flk-1+ 细胞处于高峰期的EB细胞,在人AGM区基质细胞饲养层上进一步诱导分化,并设无饲养层对照,分别于3、6、9、12 d时收获细胞计数、流式细胞术检测Sca-1+c-kit+ 细胞含量,并分析造血细胞集落形成能力.结果:诱导E14细胞形成EB过程中添加BMP4+VEGF的因子组Flk-1+细胞在第9 d达峰值(27.53%± 2.84%),与未添加因子组(8.77%± 1.12%)比较差异显著(P＜0.05).将培养9 d的EB细胞在hAGMS3、hAGMS4饲养层上进一步诱导分化,第6 d时Sca-1+c-kit+细胞达峰值,分别为7.31%±1.21%、7.62%±1.52%,其绝对数分别扩增(2.57±0.48)倍、(2.35±0.36)倍,与无饲养层组比较显著差异(P＜0.05).该分化阶段的Sca-1+c-kit+细胞具有形成各系造血细胞集落的能力.结论:人胚早期AGM区基质细胞能促进小鼠ESCs定向分化为HSCs,为研究ESCs分化为HSCs的分子机制提供了实验模型.
目的:體外模擬胚胎早期AGM區造血微環境,誘導胚胎榦細胞(ESCs)分化為造血榦細胞(HSCs).方法:將小鼠E14 ESCs在含BMP-4及VEGF的半固體培養基中誘導為擬胚體(EB),分彆于3、6、9、12、15 d時收穫EB,流式細胞術檢測Flk-1+細胞含量.取Flk-1+ 細胞處于高峰期的EB細胞,在人AGM區基質細胞飼養層上進一步誘導分化,併設無飼養層對照,分彆于3、6、9、12 d時收穫細胞計數、流式細胞術檢測Sca-1+c-kit+ 細胞含量,併分析造血細胞集落形成能力.結果:誘導E14細胞形成EB過程中添加BMP4+VEGF的因子組Flk-1+細胞在第9 d達峰值(27.53%± 2.84%),與未添加因子組(8.77%± 1.12%)比較差異顯著(P＜0.05).將培養9 d的EB細胞在hAGMS3、hAGMS4飼養層上進一步誘導分化,第6 d時Sca-1+c-kit+細胞達峰值,分彆為7.31%±1.21%、7.62%±1.52%,其絕對數分彆擴增(2.57±0.48)倍、(2.35±0.36)倍,與無飼養層組比較顯著差異(P＜0.05).該分化階段的Sca-1+c-kit+細胞具有形成各繫造血細胞集落的能力.結論:人胚早期AGM區基質細胞能促進小鼠ESCs定嚮分化為HSCs,為研究ESCs分化為HSCs的分子機製提供瞭實驗模型.
목적:체외모의배태조기AGM구조혈미배경,유도배태간세포(ESCs)분화위조혈간세포(HSCs).방법:장소서E14 ESCs재함BMP-4급VEGF적반고체배양기중유도위의배체(EB),분별우3、6、9、12、15 d시수획EB,류식세포술검측Flk-1+세포함량.취Flk-1+ 세포처우고봉기적EB세포,재인AGM구기질세포사양층상진일보유도분화,병설무사양층대조,분별우3、6、9、12 d시수획세포계수、류식세포술검측Sca-1+c-kit+ 세포함량,병분석조혈세포집락형성능력.결과:유도E14세포형성EB과정중첨가BMP4+VEGF적인자조Flk-1+세포재제9 d체봉치(27.53%± 2.84%),여미첨가인자조(8.77%± 1.12%)비교차이현저(P＜0.05).장배양9 d적EB세포재hAGMS3、hAGMS4사양층상진일보유도분화,제6 d시Sca-1+c-kit+세포체봉치,분별위7.31%±1.21%、7.62%±1.52%,기절대수분별확증(2.57±0.48)배、(2.35±0.36)배,여무사양층조비교현저차이(P＜0.05).해분화계단적Sca-1+c-kit+세포구유형성각계조혈세포집락적능력.결론:인배조기AGM구기질세포능촉진소서ESCs정향분화위HSCs,위연구ESCs분화위HSCs적분자궤제제공료실험모형.
