CAJ | 학술논문

目的:采用Survivin反义寡核苷酸(ASODN)复合物抑制survivin的表达,研究其对槲皮素诱导肝癌SSMC-7721细胞凋亡的影响.方法:体外培养人肝癌SSMC-7721细胞,取对数生长期细胞进行实验. 实验分Ⅰ,Ⅱ两部分:Ⅰ分为空白对照组(设平行组)、等量脂质体LipofectamineTM2000对照组、400 μmol/L SODN复合物组、400 μmol/L ASODN复合物组(设平行组),转染48 h;Ⅱ弃掉Ⅰ部分各组培养液,换新指定培养液,分为空白对照组、40 μmol/L槲皮素组、脂质体LipofectamineTM2000组、SODN复合物组、ASODN复合物组、ASODN复合物+ 40 μmol/L槲皮素组(联合组),孵育细胞24 h后检测. Ⅰ结束时采用RT-PCR、细胞免疫组化染色检测各组SSMC-7721细胞survivin表达变化;Ⅱ结束时用吖啶橙染色法观察细胞凋亡时形态变化,MTT法检测SSMC-7721细胞生长抑制率,Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测SSMC-7721细胞凋亡率.结果:ASODN复合物作用肝癌SSMC-7721细胞48 h后能下调survivin mRNA及Survivin蛋白的表达 (P＜0.01);与其他组比较,联合组AO染色图片可观察到凋亡小体等典型的细胞凋亡形态特征变化且凋亡细胞数量明显增多,并用MTT法、Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测显示联合组细胞的生长抑制率增高(P＜0.01)、细胞凋亡率提高(P＜0.01).结论:ASODN复合物可有效抑制肝癌SSMC-7721细胞survivin基因的表达;ASODN复合物能增强槲皮素对SSMC-7721细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用即二者具有协同作用,该作用可能与抑制survivin基因的表达有关.
목적:채용Survivin반의과핵감산(ASODN)복합물억제survivin적표체,연구기대곡피소유도간암SSMC-7721세포조망적영향.방법:체외배양인간암SSMC-7721세포,취대수생장기세포진행실험. 실험분Ⅰ,Ⅱ량부분:Ⅰ분위공백대조조(설평행조)、등량지질체LipofectamineTM2000대조조、400 μmol/L SODN복합물조、400 μmol/L ASODN복합물조(설평행조),전염48 h;Ⅱ기도Ⅰ부분각조배양액,환신지정배양액,분위공백대조조、40 μmol/L곡피소조、지질체LipofectamineTM2000조、SODN복합물조、ASODN복합물조、ASODN복합물+ 40 μmol/L곡피소조(연합조),부육세포24 h후검측. Ⅰ결속시채용RT-PCR、세포면역조화염색검측각조SSMC-7721세포survivin표체변화;Ⅱ결속시용아정등염색법관찰세포조망시형태변화,MTT법검측SSMC-7721세포생장억제솔,Annexi-V/PI쌍염류식세포의검측SSMC-7721세포조망솔.결과:ASODN복합물작용간암SSMC-7721세포48 h후능하조survivin mRNA급Survivin단백적표체 (P＜0.01);여기타조비교,연합조AO염색도편가관찰도조망소체등전형적세포조망형태특정변화차조망세포수량명현증다,병용MTT법、Annexin-V/PI쌍염류식세포의검측현시연합조세포적생장억제솔증고(P＜0.01)、세포조망솔제고(P＜0.01).결론:ASODN복합물가유효억제간암SSMC-7721세포survivin기인적표체;ASODN복합물능증강곡피소대SSMC-7721세포증식억제급유도조망적작용즉이자구유협동작용,해작용가능여억제survivin기인적표체유관.