中国海洋大学学报(自然科学版)
中國海洋大學學報(自然科學版)
중국해양대학학보(자연과학판)
PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA
2008年
5期
726-732
,共7页
刘滨%臧晓南%刘顺梅%张学成%雷霁霖
劉濱%臧曉南%劉順梅%張學成%雷霽霖
류빈%장효남%류순매%장학성%뢰제림
大菱鲆%生长激素基因%cDNA%SMART-RACE%序列分析
大蔆鲆%生長激素基因%cDNA%SMART-RACE%序列分析
대릉평%생장격소기인%cDNA%SMART-RACE%서렬분석
为了从分子水平研究大菱鲆生长激素作用机制及进化机制.以大菱鲆(Scophthalmus maximus)为材料从脑垂体中提取mRNA,利用SMART-RACE技术建立大菱鲆脑垂体cDNA文库,并从该文库中克隆出大菱鲆生长激素(growth Hormone,GH)cDNA全长序列.测序结果表明,克隆的大菱鲆GH cDNA序列全长为876 bp,包括108 bp的5'UTR和174 bp的3'UTR序列.该基因的开放阅读框全长591 bp,编码由197氨基酸残基组成的生长激素成熟肽序列,用生物软件DNASTAR计算大菱鲆生长激素蛋白分子量为1*!909.22,等电点为6.24.将大菱鲆与漠斑牙鲆、褐牙鲆等共7种鲆鲽鱼类GH成熟肽氨基酸序列进行比较分析,结果显示大菱鲆与其他6种鲆鲽鱼类序列同源性均为70%左右,而鲆科鱼类与鲽科鱼类间生长激素基因同源性很高(≥80%),说明大菱鲆与鲆科、鲽科鱼类的同源性较低.另外,运用PAUP软件对7种鲆蝶科鱼类与另外8种不同种属鱼类进行了分子系统进化树分析,结果与根据传统的形态学和生化特征分类进化地位基本一致,大菱鲆单独形成1个分支且与鲆科和鲽科鱼类相距较远,此结果为在形态学分类基础上进一步定义菱鲆属鱼类分类提供了理论依据.
為瞭從分子水平研究大蔆鲆生長激素作用機製及進化機製.以大蔆鲆(Scophthalmus maximus)為材料從腦垂體中提取mRNA,利用SMART-RACE技術建立大蔆鲆腦垂體cDNA文庫,併從該文庫中剋隆齣大蔆鲆生長激素(growth Hormone,GH)cDNA全長序列.測序結果錶明,剋隆的大蔆鲆GH cDNA序列全長為876 bp,包括108 bp的5'UTR和174 bp的3'UTR序列.該基因的開放閱讀框全長591 bp,編碼由197氨基痠殘基組成的生長激素成熟肽序列,用生物軟件DNASTAR計算大蔆鲆生長激素蛋白分子量為1*!909.22,等電點為6.24.將大蔆鲆與漠斑牙鲆、褐牙鲆等共7種鲆鰈魚類GH成熟肽氨基痠序列進行比較分析,結果顯示大蔆鲆與其他6種鲆鰈魚類序列同源性均為70%左右,而鲆科魚類與鰈科魚類間生長激素基因同源性很高(≥80%),說明大蔆鲆與鲆科、鰈科魚類的同源性較低.另外,運用PAUP軟件對7種鲆蝶科魚類與另外8種不同種屬魚類進行瞭分子繫統進化樹分析,結果與根據傳統的形態學和生化特徵分類進化地位基本一緻,大蔆鲆單獨形成1箇分支且與鲆科和鰈科魚類相距較遠,此結果為在形態學分類基礎上進一步定義蔆鲆屬魚類分類提供瞭理論依據.
위료종분자수평연구대릉평생장격소작용궤제급진화궤제.이대릉평(Scophthalmus maximus)위재료종뇌수체중제취mRNA,이용SMART-RACE기술건립대릉평뇌수체cDNA문고,병종해문고중극륭출대릉평생장격소(growth Hormone,GH)cDNA전장서렬.측서결과표명,극륭적대릉평GH cDNA서렬전장위876 bp,포괄108 bp적5'UTR화174 bp적3'UTR서렬.해기인적개방열독광전장591 bp,편마유197안기산잔기조성적생장격소성숙태서렬,용생물연건DNASTAR계산대릉평생장격소단백분자량위1*!909.22,등전점위6.24.장대릉평여막반아평、갈아평등공7충평접어류GH성숙태안기산서렬진행비교분석,결과현시대릉평여기타6충평접어류서렬동원성균위70%좌우,이평과어류여접과어류간생장격소기인동원성흔고(≥80%),설명대릉평여평과、접과어류적동원성교저.령외,운용PAUP연건대7충평접과어류여령외8충불동충속어류진행료분자계통진화수분석,결과여근거전통적형태학화생화특정분류진화지위기본일치,대릉평단독형성1개분지차여평과화접과어류상거교원,차결과위재형태학분류기출상진일보정의릉평속어류분류제공료이론의거.