生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2012年
1期
31-34
,共4页
黄爱玲%冯荣虎%吕暾%李森
黃愛玲%馮榮虎%呂暾%李森
황애령%풍영호%려돈%리삼
噬菌体展示%单链抗体%兔源抗体库
噬菌體展示%單鏈抗體%兔源抗體庫
서균체전시%단련항체%토원항체고
目的:构建天然兔源噬菌体单链抗体库.方法:采用RT - PCR法从未免疫的兔子脾脏中克隆得到抗体重链可变区(VH)与轻链可变区(VL)基因,重叠PCR将VH和VL拼接成scFv片段,将scFv连接到噬菌粒pComb3XSS上,电转入XL1 - Blue菌中,得到单链抗体库,并用此抗体库筛选抗肌酸激酶抗体.结果:构建了容量为4×108,基因重组率95％的单链抗体库,DNA指纹图谱显示抗体库多样性良好.以肌酸激酶为抗原,从该库中筛到3株抗肌酸激酶的抗体.结论:分析表明构建的天然兔源单链抗体库质量良好,可用于快速筛选、制备多种单链抗体.
目的:構建天然兔源噬菌體單鏈抗體庫.方法:採用RT - PCR法從未免疫的兔子脾髒中剋隆得到抗體重鏈可變區(VH)與輕鏈可變區(VL)基因,重疊PCR將VH和VL拼接成scFv片段,將scFv連接到噬菌粒pComb3XSS上,電轉入XL1 - Blue菌中,得到單鏈抗體庫,併用此抗體庫篩選抗肌痠激酶抗體.結果:構建瞭容量為4×108,基因重組率95％的單鏈抗體庫,DNA指紋圖譜顯示抗體庫多樣性良好.以肌痠激酶為抗原,從該庫中篩到3株抗肌痠激酶的抗體.結論:分析錶明構建的天然兔源單鏈抗體庫質量良好,可用于快速篩選、製備多種單鏈抗體.
목적:구건천연토원서균체단련항체고.방법:채용RT - PCR법종미면역적토자비장중극륭득도항체중련가변구(VH)여경련가변구(VL)기인,중첩PCR장VH화VL병접성scFv편단,장scFv련접도서균립pComb3XSS상,전전입XL1 - Blue균중,득도단련항체고,병용차항체고사선항기산격매항체.결과:구건료용량위4×108,기인중조솔95％적단련항체고,DNA지문도보현시항체고다양성량호.이기산격매위항원,종해고중사도3주항기산격매적항체.결론:분석표명구건적천연토원단련항체고질량량호,가용우쾌속사선、제비다충단련항체.
