中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2003年
1期
41-45
,共5页
鹿培源%邵世滨%倪菊华%贾弘禔
鹿培源%邵世濱%倪菊華%賈弘禔
록배원%소세빈%예국화%가홍제
MLP,生肌素,nAChR γ-亚基基因启动子,结合活性
MLP,生肌素,nAChR γ-亞基基因啟動子,結閤活性
MLP,생기소,nAChR γ-아기기인계동자,결합활성
构建表达GAL4-MLP融合蛋白的真核表达质粒pBind-MLP. 哺乳动物细胞双杂交试验表明,MLP与生肌素E12复合物存在细胞内的相互作用. 构建表达GST融合蛋白GST-MLP和GST-E12的原核表达质粒pGEX-2TK-MLP以及pGEX-4T-2-E12. 在E.coli BL21中诱导表达GST-MLP、GST-生肌素和GST-E12,并用亲和层析法纯化了这3种GST融合蛋白. 这3种GST融合蛋白进行的凝胶阻滞试验表明,MLP可以增强生肌素-E12复合物对AChR γ亚基基因启动子的结合活性. 研究初步阐明了MLP增强nAChR γ亚基基因启动子在分化C2C12细胞中的转录活性的分子机制.
構建錶達GAL4-MLP融閤蛋白的真覈錶達質粒pBind-MLP. 哺乳動物細胞雙雜交試驗錶明,MLP與生肌素E12複閤物存在細胞內的相互作用. 構建錶達GST融閤蛋白GST-MLP和GST-E12的原覈錶達質粒pGEX-2TK-MLP以及pGEX-4T-2-E12. 在E.coli BL21中誘導錶達GST-MLP、GST-生肌素和GST-E12,併用親和層析法純化瞭這3種GST融閤蛋白. 這3種GST融閤蛋白進行的凝膠阻滯試驗錶明,MLP可以增彊生肌素-E12複閤物對AChR γ亞基基因啟動子的結閤活性. 研究初步闡明瞭MLP增彊nAChR γ亞基基因啟動子在分化C2C12細胞中的轉錄活性的分子機製.
구건표체GAL4-MLP융합단백적진핵표체질립pBind-MLP. 포유동물세포쌍잡교시험표명,MLP여생기소E12복합물존재세포내적상호작용. 구건표체GST융합단백GST-MLP화GST-E12적원핵표체질립pGEX-2TK-MLP이급pGEX-4T-2-E12. 재E.coli BL21중유도표체GST-MLP、GST-생기소화GST-E12,병용친화층석법순화료저3충GST융합단백. 저3충GST융합단백진행적응효조체시험표명,MLP가이증강생기소-E12복합물대AChR γ아기기인계동자적결합활성. 연구초보천명료MLP증강nAChR γ아기기인계동자재분화C2C12세포중적전록활성적분자궤제.
