武汉大学学报(自然科学版)
武漢大學學報(自然科學版)
무한대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY
2000年
6期
751-755
,共5页
胡德文%何之常%史红梅%张景昱%袁文静
鬍德文%何之常%史紅梅%張景昱%袁文靜
호덕문%하지상%사홍매%장경욱%원문정
Ca2+/caM依赖性蛋白激酶%Mg2+-ATP酶%光敏核不育水稻农垦58s
Ca2+/caM依賴性蛋白激酶%Mg2+-ATP酶%光敏覈不育水稻農墾58s
Ca2+/caM의뢰성단백격매%Mg2+-ATP매%광민핵불육수도농은58s
通过高速离心、(NH4)2SO4沉淀、琼脂糖凝胶过滤和CaM-sepharose4B亲和层析,从HPGMR(58S)叶片中初步纯化出Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶.纯化的Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶经SDS-聚丙烯酰胺凝胶线性梯度电泳,亚基分子量约为55×103.在Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶的标准反应体系中,存在过量的ATP,提取磷酸化反应剩余的ATP,用叶绿体Mg2+-ATP酶分解ATP,最后用复合孔雀绿测定无机磷,从而来计算Ca2+/caM依赖性蛋白激酶的活性.实验结果表明,该酶活性是依赖Ca2+和caM的,并且EGTA和TFP对酶活性有明显的抑制作用.
通過高速離心、(NH4)2SO4沉澱、瓊脂糖凝膠過濾和CaM-sepharose4B親和層析,從HPGMR(58S)葉片中初步純化齣Ca2+/CaM依賴性蛋白激酶.純化的Ca2+/CaM依賴性蛋白激酶經SDS-聚丙烯酰胺凝膠線性梯度電泳,亞基分子量約為55×103.在Ca2+/CaM依賴性蛋白激酶的標準反應體繫中,存在過量的ATP,提取燐痠化反應剩餘的ATP,用葉綠體Mg2+-ATP酶分解ATP,最後用複閤孔雀綠測定無機燐,從而來計算Ca2+/caM依賴性蛋白激酶的活性.實驗結果錶明,該酶活性是依賴Ca2+和caM的,併且EGTA和TFP對酶活性有明顯的抑製作用.
통과고속리심、(NH4)2SO4침정、경지당응효과려화CaM-sepharose4B친화층석,종HPGMR(58S)협편중초보순화출Ca2+/CaM의뢰성단백격매.순화적Ca2+/CaM의뢰성단백격매경SDS-취병희선알응효선성제도전영,아기분자량약위55×103.재Ca2+/CaM의뢰성단백격매적표준반응체계중,존재과량적ATP,제취린산화반응잉여적ATP,용협록체Mg2+-ATP매분해ATP,최후용복합공작록측정무궤린,종이래계산Ca2+/caM의뢰성단백격매적활성.실험결과표명,해매활성시의뢰Ca2+화caM적,병차EGTA화TFP대매활성유명현적억제작용.
