CAJ | 학술논문

目的:观察人上皮细胞生长因子受体2(HER2)靶向重组的活性截短型Bid(tBid)融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用.方法:将抗HER2单链抗体基因e23sFv、与绿脓杆菌外毒素(PE)的转膜结构域基因(PEII)和tbid基因连接,构建成immuno-tbid(e23 sFv-PEII-tbid)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,通过Annexin Ⅴ染色、流式细胞仪检测观察其促凋亡作用.结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出tBid的表达,SOSP-9607细胞出现明显的固缩,核浓缩等凋亡特征.Annexin Ⅴ染色、流式细胞仪检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为42%,对照组细胞仅6%,表明细胞膜表面有磷脂酰丝氨酸外翻,提示重组immuno-tbid基因表达后有促凋亡作用.结论:重组immuno-tbid基因可在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导其细胞凋亡.
목적:관찰인상피세포생장인자수체2(HER2)파향중조적활성절단형Bid(tBid)융합단백대골육류SOSP-9607세포적촉조망작용.방법:장항HER2단련항체기인e23sFv、여록농간균외독소(PE)적전막결구역기인(PEII)화tbid기인련접,구건성immuno-tbid(e23 sFv-PEII-tbid)기인,장기극륭입진핵표체재체pCMV중,전염SOSP-9607세포,간접면역형광법검측목적단백표체화세포형태학변화,통과Annexin Ⅴ염색、류식세포의검측관찰기촉조망작용.결과:전염SOSP-9607세포후,간접면역형광염색검측출tBid적표체,SOSP-9607세포출현명현적고축,핵농축등조망특정.Annexin Ⅴ염색、류식세포의검측가견명현적조망세포,조망솔위42%,대조조세포부6%,표명세포막표면유린지선사안산외번,제시중조immuno-tbid기인표체후유촉조망작용.결론:중조immuno-tbid기인가재전염적SOSP-9607세포중표체,병유도기세포조망.