CAJ | 학술논문

目的:观察杜仲干预去势大鼠腰椎骨及对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone mesenchymal stem cells,rBMSCs)转化生长因子β(transforming growth factor β,TGFβ)和成纤维生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)表达的调控.方法:(1)80只4月龄雌性SD大鼠随机分成4组,假手术组、阴性对照组、阳性对照组和实验组.除假手术组打开腹腔、暴露卵巢后即缝合外,其他3组均摘除双侧卵巢.大鼠手术10天后,阳性对照组和实验组分别用阿尔法骨化醇(ALF)和盐杜仲灌胃,每天一次,另外2组正常饲养.灌胃3个月后,解剖取各组第一腰椎骨,4%多聚甲醛固定,3天后浸入4%EDTA溶液中脱钙,4周后冰冻切片,免疫组化检测各组中TGFβ与FGF2表达;(2)取盐杜仲粉末2 g,分别加水或甲醇至15 ml,室温震荡1 h,静置过夜后,离心弃沉淀.水浸上清不经进一步处理即得水提取物;甲醇浸上清经真空浓缩,再加水至15 ml溶解剩余物后,得醇提取物.水/醇提取物均经0.22 μm膜过滤,-20℃保存;(3)取2月龄SD大鼠骨髓细胞,置含20%小牛血清的DMEM/F12培养基中,37℃,5%CO2培养,传代3次后进行杜仲水/醇提取物诱导,诱导物分为10-2、10-3、10-4和10-54个稀释度并设4个重复组,同时设一不加诱导物的对照细胞培养组.诱导6天后,免疫细胞化学法测定BMP-2表达.结果:与假手术组比较,阴性对照组腰椎骨中TGFβ、FGF2表达均下降;与阴性对照组相比,ALF阳性对照组和杜仲实验组TGFβ和FGF2表达上升;与对照细胞培养组比较,杜仲水/醇提取物诱导rBMSCs FGF2的表达显著升高,但TGFβ的表达变化不显著.结论:杜仲改善去势大鼠骨质疏松状态与调节TGFβ、FGF2表达相关,杜仲具有直接刺激细胞FGF2的表达的作用.
목적:관찰두중간예거세대서요추골급대대서골수간충질간세포(rat bone mesenchymal stem cells,rBMSCs)전화생장인자β(transforming growth factor β,TGFβ)화성섬유생장인자2(fibroblast growth factor 2,FGF2)표체적조공.방법:(1)80지4월령자성SD대서수궤분성4조,가수술조、음성대조조、양성대조조화실험조.제가수술조타개복강、폭로란소후즉봉합외,기타3조균적제쌍측란소.대서수술10천후,양성대조조화실험조분별용아이법골화순(ALF)화염두중관위,매천일차,령외2조정상사양.관위3개월후,해부취각조제일요추골,4%다취갑철고정,3천후침입4%EDTA용액중탈개,4주후빙동절편,면역조화검측각조중TGFβ여FGF2표체;(2)취염두중분말2 g,분별가수혹갑순지15 ml,실온진탕1 h,정치과야후,리심기침정.수침상청불경진일보처리즉득수제취물;갑순침상청경진공농축,재가수지15 ml용해잉여물후,득순제취물.수/순제취물균경0.22 μm막과려,-20℃보존;(3)취2월령SD대서골수세포,치함20%소우혈청적DMEM/F12배양기중,37℃,5%CO2배양,전대3차후진행두중수/순제취물유도,유도물분위10-2、10-3、10-4화10-54개희석도병설4개중복조,동시설일불가유도물적대조세포배양조.유도6천후,면역세포화학법측정BMP-2표체.결과:여가수술조비교,음성대조조요추골중TGFβ、FGF2표체균하강;여음성대조조상비,ALF양성대조조화두중실험조TGFβ화FGF2표체상승;여대조세포배양조비교,두중수/순제취물유도rBMSCs FGF2적표체현저승고,단TGFβ적표체변화불현저.결론:두중개선거세대서골질소송상태여조절TGFβ、FGF2표체상관,두중구유직접자격세포FGF2적표체적작용.