CAJ | 학술논문

为获得抗旱和耐盐性提高的甘蓝植株,通过农杆菌介导法将来自菠菜的甜菜碱醛脱氢酶(Betaine Aldehyde Dehydrogenase,BADH)基因导入甘蓝品系03079,并采用正交设计优化影响转化效率的参数,建立了甘蓝高效转化体系,即以侵染液为AA液体培养基、乙酰丁香酮200 μmol L-1、侵染时间20 min、共培养天数2 d为最佳转化参数,在该条件下转化率可达54.26%.转基因甘蓝植株经PCR检测初步说明BADH基因已导入甘蓝中,Southern杂交证明BADH基因已稳定整合到甘蓝基因组中.甜菜碱脱氢酶活性测定结果表明,经过聚乙二醇(PEG)、NaCl和干旱处理的转基因甘蓝植株的BADH酶的平均比活力范围在2.1 U mg-1～3.6 U mg-1之间,不同处理的转基因株系酶比活力显著高于相应的未转基因株系.膜的相对电导率测定结果说明,经过PEG、NaCl和干旱处理的转基因植株平均相对电导率在16.2%～32.6%之间,耐逆境胁迫处理后的绝大多数转基因株系相对电导率显著低于相应对照.多数转BADH基因甘蓝植株在干旱、盐胁迫和PEG胁迫条件下生长势强于未转基因植株,表现为大多数转基因株系株高增幅显著高于对照,说明BADH基因的导入能提高转基因甘蓝植株的抗旱和耐盐性.我们获得的抗旱和耐盐能力明显提高的转基因甘蓝植株,可作为培育耐盐、抗旱甘蓝品种的种质材料.
위획득항한화내염성제고적감람식주,통과농간균개도법장래자파채적첨채감철탈경매(Betaine Aldehyde Dehydrogenase,BADH)기인도입감람품계03079,병채용정교설계우화영향전화효솔적삼수,건립료감람고효전화체계,즉이침염액위AA액체배양기、을선정향동200 μmol L-1、침염시간20 min、공배양천수2 d위최가전화삼수,재해조건하전화솔가체54.26%.전기인감람식주경PCR검측초보설명BADH기인이도입감람중,Southern잡교증명BADH기인이은정정합도감람기인조중.첨채감탈경매활성측정결과표명,경과취을이순(PEG)、NaCl화간한처리적전기인감람식주적BADH매적평균비활력범위재2.1 U mg-1～3.6 U mg-1지간,불동처리적전기인주계매비활력현저고우상응적미전기인주계.막적상대전도솔측정결과설명,경과PEG、NaCl화간한처리적전기인식주평균상대전도솔재16.2%～32.6%지간,내역경협박처리후적절대다수전기인주계상대전도솔현저저우상응대조.다수전BADH기인감람식주재간한、염협박화PEG협박조건하생장세강우미전기인식주,표현위대다수전기인주계주고증폭현저고우대조,설명BADH기인적도입능제고전기인감람식주적항한화내염성.아문획득적항한화내염능력명현제고적전기인감람식주,가작위배육내염、항한감람품충적충질재료.