细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
8期
692-694
,共3页
张利娜%张改平%席俊%苗现伟%王丽%乔松林
張利娜%張改平%席俊%苗現偉%王麗%喬鬆林
장리나%장개평%석준%묘현위%왕려%교송림
FcγRⅢ重组蛋白%原核表达%包涵体%复性
FcγRⅢ重組蛋白%原覈錶達%包涵體%複性
FcγRⅢ중조단백%원핵표체%포함체%복성
目的: 制备纯化重组蛋白mFcγRⅢ,并鉴定其生物学活性.方法: 从克隆载体mRⅢ-T中扩增mFcγRⅢ胞外区,构建原核表达载体pETmRⅢ,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot对重组表达蛋白进行鉴定;表达产物通过包涵体纯化后用稀释方法复性;ELISA检测复性蛋白活性.结果: 成功构建了重组表达质粒pETmRⅢ,纯化和复性了重组蛋白mFcγRⅢ;复性的重组蛋白mFcγRⅢ具有较强的体外活性.结论: 原核重组蛋白mFcγRⅢ复性后具有较强的体外结合配体特性,为探索重组蛋白治疗自身免疫病奠定了基础.
目的: 製備純化重組蛋白mFcγRⅢ,併鑒定其生物學活性.方法: 從剋隆載體mRⅢ-T中擴增mFcγRⅢ胞外區,構建原覈錶達載體pETmRⅢ,轉化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導重組蛋白錶達,SDS-PAGE和Western blot對重組錶達蛋白進行鑒定;錶達產物通過包涵體純化後用稀釋方法複性;ELISA檢測複性蛋白活性.結果: 成功構建瞭重組錶達質粒pETmRⅢ,純化和複性瞭重組蛋白mFcγRⅢ;複性的重組蛋白mFcγRⅢ具有較彊的體外活性.結論: 原覈重組蛋白mFcγRⅢ複性後具有較彊的體外結閤配體特性,為探索重組蛋白治療自身免疫病奠定瞭基礎.
목적: 제비순화중조단백mFcγRⅢ,병감정기생물학활성.방법: 종극륭재체mRⅢ-T중확증mFcγRⅢ포외구,구건원핵표체재체pETmRⅢ,전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도중조단백표체,SDS-PAGE화Western blot대중조표체단백진행감정;표체산물통과포함체순화후용희석방법복성;ELISA검측복성단백활성.결과: 성공구건료중조표체질립pETmRⅢ,순화화복성료중조단백mFcγRⅢ;복성적중조단백mFcγRⅢ구유교강적체외활성.결론: 원핵중조단백mFcγRⅢ복성후구유교강적체외결합배체특성,위탐색중조단백치료자신면역병전정료기출.
