郑州大学学报（医学版）
鄭州大學學報（醫學版）
정주대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
3期
448-450
,共3页
董翠%阴志刚%王纯耀%张旭东
董翠%陰誌剛%王純耀%張旭東
동취%음지강%왕순요%장욱동
人端粒酶逆转录酶启动子%真核荧光表达载体%构建%表达
人耑粒酶逆轉錄酶啟動子%真覈熒光錶達載體%構建%錶達
인단립매역전록매계동자%진핵형광표체재체%구건%표체
目的:克隆人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子,构建真核表达载体pEGFP-C3-hTERTp.方法:PCR方法扩增出hTERTp,依次克隆至pGEM-T Easy载体和重组载体pEGFP-C3上.经酶切和测序鉴定后,重组质粒pEGFP-C3-hTERTp转染人胚肾293A细胞,并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况.结果:成功扩增出276 bp的hTERTp,测序结果与GenBank中hTERT启动子DNA序列完全一致.重组载体pEGFP-C3-hTERTp转染293A细胞能观察到荧光表达.结论:成功构建了hTERT启动子调控的真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-hTERTp,其能够在人胚肾293A细胞中表达.
目的:剋隆人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)啟動子,構建真覈錶達載體pEGFP-C3-hTERTp.方法:PCR方法擴增齣hTERTp,依次剋隆至pGEM-T Easy載體和重組載體pEGFP-C3上.經酶切和測序鑒定後,重組質粒pEGFP-C3-hTERTp轉染人胚腎293A細胞,併在熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白的錶達情況.結果:成功擴增齣276 bp的hTERTp,測序結果與GenBank中hTERT啟動子DNA序列完全一緻.重組載體pEGFP-C3-hTERTp轉染293A細胞能觀察到熒光錶達.結論:成功構建瞭hTERT啟動子調控的真覈綠色熒光錶達載體pEGFP-C3-hTERTp,其能夠在人胚腎293A細胞中錶達.
목적:극륭인단립매역전록매(hTERT)계동자,구건진핵표체재체pEGFP-C3-hTERTp.방법:PCR방법확증출hTERTp,의차극륭지pGEM-T Easy재체화중조재체pEGFP-C3상.경매절화측서감정후,중조질립pEGFP-C3-hTERTp전염인배신293A세포,병재형광현미경하관찰록색형광단백적표체정황.결과:성공확증출276 bp적hTERTp,측서결과여GenBank중hTERT계동자DNA서렬완전일치.중조재체pEGFP-C3-hTERTp전염293A세포능관찰도형광표체.결론:성공구건료hTERT계동자조공적진핵록색형광표체재체pEGFP-C3-hTERTp,기능구재인배신293A세포중표체.
