生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
10期
215-220,230
,共7页
刘聪%李颖%李季伦%姜伟%田杰生
劉聰%李穎%李季倫%薑偉%田傑生
류총%리영%리계륜%강위%전걸생
趋磁螺菌 MSR-1%Fe-超氧化物歧化酶%谷胱甘肽过氧化物酶%过氧化氢酶 HPII
趨磁螺菌 MSR-1%Fe-超氧化物歧化酶%穀胱甘肽過氧化物酶%過氧化氫酶 HPII
추자라균 MSR-1%Fe-초양화물기화매%곡광감태과양화물매%과양화경매 HPII
在格瑞斯瓦尔德磁螺菌(Magnetospirillum gryphiswaldense)MSR-1中分别过量表达3种抗氧化酶Fe-超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶HPII,并分析过量表达这3种酶对趋磁螺菌MSR-1耐氧性的影响.通过PCR分别扩增大肠杆菌DH5α的Fe-超氧化物歧化酶(sodB)、谷胱甘肽过氧化物酶(btuE)、过氧化氢酶HPII(kate)基因序列,将前两个片段分别连接到广宿主质粒pBBR1MCS-2上.后一个片段连接到广宿主质粒pBBR1MCS-5上,构建成表达质粒pBBR1MCS-sodB,pBBR1MCS-btuE和pBBR1MCS-katE,将3个质粒通过双亲接合转移的方法分别转入趋磁螺菌MSR-1.3种抗氧化酶过表达对趋磁螺菌MSR-1耐氧性影响的试验结果为过量表达Fe-超氧化物歧化酶对菌体生长影响不明显;过量表达谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶HPII使趋磁螺菌MSR-1致死.上述试验结果表明抗氧化酶系在菌体耐氧过程中的全局协调调控的重要性.
在格瑞斯瓦爾德磁螺菌(Magnetospirillum gryphiswaldense)MSR-1中分彆過量錶達3種抗氧化酶Fe-超氧化物歧化酶、穀胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶HPII,併分析過量錶達這3種酶對趨磁螺菌MSR-1耐氧性的影響.通過PCR分彆擴增大腸桿菌DH5α的Fe-超氧化物歧化酶(sodB)、穀胱甘肽過氧化物酶(btuE)、過氧化氫酶HPII(kate)基因序列,將前兩箇片段分彆連接到廣宿主質粒pBBR1MCS-2上.後一箇片段連接到廣宿主質粒pBBR1MCS-5上,構建成錶達質粒pBBR1MCS-sodB,pBBR1MCS-btuE和pBBR1MCS-katE,將3箇質粒通過雙親接閤轉移的方法分彆轉入趨磁螺菌MSR-1.3種抗氧化酶過錶達對趨磁螺菌MSR-1耐氧性影響的試驗結果為過量錶達Fe-超氧化物歧化酶對菌體生長影響不明顯;過量錶達穀胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶HPII使趨磁螺菌MSR-1緻死.上述試驗結果錶明抗氧化酶繫在菌體耐氧過程中的全跼協調調控的重要性.
재격서사와이덕자라균(Magnetospirillum gryphiswaldense)MSR-1중분별과량표체3충항양화매Fe-초양화물기화매、곡광감태과양화물매화과양화경매HPII,병분석과량표체저3충매대추자라균MSR-1내양성적영향.통과PCR분별확증대장간균DH5α적Fe-초양화물기화매(sodB)、곡광감태과양화물매(btuE)、과양화경매HPII(kate)기인서렬,장전량개편단분별련접도엄숙주질립pBBR1MCS-2상.후일개편단련접도엄숙주질립pBBR1MCS-5상,구건성표체질립pBBR1MCS-sodB,pBBR1MCS-btuE화pBBR1MCS-katE,장3개질립통과쌍친접합전이적방법분별전입추자라균MSR-1.3충항양화매과표체대추자라균MSR-1내양성영향적시험결과위과량표체Fe-초양화물기화매대균체생장영향불명현;과량표체곡광감태과양화물매、과양화경매HPII사추자라균MSR-1치사.상술시험결과표명항양화매계재균체내양과정중적전국협조조공적중요성.
