作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2011年
4期
612-619
,共8页
孙晓丽%李勇%才华%柏锡%纪巍%季佐军%朱延明
孫曉麗%李勇%纔華%柏錫%紀巍%季佐軍%硃延明
손효려%리용%재화%백석%기외%계좌군%주연명
bZIP%转录因子%ABA信号传导%ABRE元件%ABA响应基因
bZIP%轉錄因子%ABA信號傳導%ABRE元件%ABA響應基因
bZIP%전록인자%ABA신호전도%ABRE원건%ABA향응기인
ABA作为一种重要的植物激素和生长凋节剂,介导了高等植物在营养生长阶段对各种外界环境的响应和适应.bZIP类转录因子可以通过ABA依赖途径和ABA非依赖途径调节植物的生长发育和对非生物胁迫的耐性.本研究通过AtbZIP1 T-DNA插入突变的拟南芥植株ko-1(SALK_059343)和ko-2(SALK_069489C)在ABA处理后的表型实验,验证了AtbZIP1参与ABA依赖的信号传导通路.采用"三引物法",分别在DNA水平和RNA水平通过PCR和RT-PCR验证了AtbZIP1基因在拟南芥突变体中的沉默效果.定量分析数据表明,在种子萌发阶段,经过0.6μmolL-1ABA和0.8 μmol L-1 ABA处理后,AtbZIP1 缺失突变体拟南芥植株萌发率和叶片展开/绿色率比野生型植株高,在幼苗生长阶段,经过50μmol L-1ABA处理后,AtbZIP1缺失突变体拟南芥植株根长比野生型植株长.为了确定AtbZIP1基因参与ABA信号传导是否依赖于ABRE元件,在大肠杆菌中表达了AtbZIP1 HIS6融合蛋白,并设计了核心序列为CACGTG的ABRE元件.凝胶阻滞电泳结果表明AtbZIP1融合蛋白可以与ABRE元件特异性结合.半定量RT-PCR分析表明,AtbZIP1基因的缺失改变了下游的ABA响应基因的表达.该结果表明,AtbZIP1可以通过与ABRE元件结合调节植物对ABA处理的敏感性和下游ABA响应基因的表达,从而参与植物的ABA信号传导通路.
ABA作為一種重要的植物激素和生長凋節劑,介導瞭高等植物在營養生長階段對各種外界環境的響應和適應.bZIP類轉錄因子可以通過ABA依賴途徑和ABA非依賴途徑調節植物的生長髮育和對非生物脅迫的耐性.本研究通過AtbZIP1 T-DNA插入突變的擬南芥植株ko-1(SALK_059343)和ko-2(SALK_069489C)在ABA處理後的錶型實驗,驗證瞭AtbZIP1參與ABA依賴的信號傳導通路.採用"三引物法",分彆在DNA水平和RNA水平通過PCR和RT-PCR驗證瞭AtbZIP1基因在擬南芥突變體中的沉默效果.定量分析數據錶明,在種子萌髮階段,經過0.6μmolL-1ABA和0.8 μmol L-1 ABA處理後,AtbZIP1 缺失突變體擬南芥植株萌髮率和葉片展開/綠色率比野生型植株高,在幼苗生長階段,經過50μmol L-1ABA處理後,AtbZIP1缺失突變體擬南芥植株根長比野生型植株長.為瞭確定AtbZIP1基因參與ABA信號傳導是否依賴于ABRE元件,在大腸桿菌中錶達瞭AtbZIP1 HIS6融閤蛋白,併設計瞭覈心序列為CACGTG的ABRE元件.凝膠阻滯電泳結果錶明AtbZIP1融閤蛋白可以與ABRE元件特異性結閤.半定量RT-PCR分析錶明,AtbZIP1基因的缺失改變瞭下遊的ABA響應基因的錶達.該結果錶明,AtbZIP1可以通過與ABRE元件結閤調節植物對ABA處理的敏感性和下遊ABA響應基因的錶達,從而參與植物的ABA信號傳導通路.
ABA작위일충중요적식물격소화생장조절제,개도료고등식물재영양생장계단대각충외계배경적향응화괄응.bZIP류전록인자가이통과ABA의뢰도경화ABA비의뢰도경조절식물적생장발육화대비생물협박적내성.본연구통과AtbZIP1 T-DNA삽입돌변적의남개식주ko-1(SALK_059343)화ko-2(SALK_069489C)재ABA처리후적표형실험,험증료AtbZIP1삼여ABA의뢰적신호전도통로.채용"삼인물법",분별재DNA수평화RNA수평통과PCR화RT-PCR험증료AtbZIP1기인재의남개돌변체중적침묵효과.정량분석수거표명,재충자맹발계단,경과0.6μmolL-1ABA화0.8 μmol L-1 ABA처리후,AtbZIP1 결실돌변체의남개식주맹발솔화협편전개/록색솔비야생형식주고,재유묘생장계단,경과50μmol L-1ABA처리후,AtbZIP1결실돌변체의남개식주근장비야생형식주장.위료학정AtbZIP1기인삼여ABA신호전도시부의뢰우ABRE원건,재대장간균중표체료AtbZIP1 HIS6융합단백,병설계료핵심서렬위CACGTG적ABRE원건.응효조체전영결과표명AtbZIP1융합단백가이여ABRE원건특이성결합.반정량RT-PCR분석표명,AtbZIP1기인적결실개변료하유적ABA향응기인적표체.해결과표명,AtbZIP1가이통과여ABRE원건결합조절식물대ABA처리적민감성화하유ABA향응기인적표체,종이삼여식물적ABA신호전도통로.