现代农业科技
現代農業科技
현대농업과기
XIANDAIHUA NONGYE
2011年
21期
15-17
,共3页
马铃薯病毒%RT-PcR%检测体系%建立
馬鈴藷病毒%RT-PcR%檢測體繫%建立
마령서병독%RT-PcR%검측체계%건립
potato viruses%RT-PCR%detection system%establishment
依据马铃薯病毒PVS、PVX、PLRV、PVA的CP保守序列设计特异性引物，从马铃薯病叶组织中提取出病毒总RNA，进行cDNA合成和PCR扩增，得到了与预期片段长度一致的PCR特异扩增产物，建立了能够同步检测PVS、PVX、PLRV、PVA的RT-PCR多重检测体系。该方法对PVS、PVX、PLRV、PVA扩增出的靶带大小分别为435、625、222、300bp，凝胶电泳易辨别区分。研究结果表明，该方法特异性好、灵敏度高、快速简便，为马铃薯病毒的高效检测提供了有效手段。
依據馬鈴藷病毒PVS、PVX、PLRV、PVA的CP保守序列設計特異性引物，從馬鈴藷病葉組織中提取齣病毒總RNA，進行cDNA閤成和PCR擴增，得到瞭與預期片段長度一緻的PCR特異擴增產物，建立瞭能夠同步檢測PVS、PVX、PLRV、PVA的RT-PCR多重檢測體繫。該方法對PVS、PVX、PLRV、PVA擴增齣的靶帶大小分彆為435、625、222、300bp，凝膠電泳易辨彆區分。研究結果錶明，該方法特異性好、靈敏度高、快速簡便，為馬鈴藷病毒的高效檢測提供瞭有效手段。
의거마령서병독PVS、PVX、PLRV、PVA적CP보수서렬설계특이성인물，종마령서병협조직중제취출병독총RNA，진행cDNA합성화PCR확증，득도료여예기편단장도일치적PCR특이확증산물，건립료능구동보검측PVS、PVX、PLRV、PVA적RT-PCR다중검측체계。해방법대PVS、PVX、PLRV、PVA확증출적파대대소분별위435、625、222、300bp，응효전영역변별구분。연구결과표명，해방법특이성호、령민도고、쾌속간편，위마령서병독적고효검측제공료유효수단。
Based on the nucleotide sequence of the coat protein（CP）gene of the four main potato virus（PVS,PVX,PLRV,PVA）to design DNA prlmers.The total RNA was directly extracted from virus infected potato leaves.By the reverse transcription and polymerase chain reaction （RT,-PCR）, and a specific fragment with expected length was obta/ned.The optimized multiplex reverse transcription polymerase chain reaction （m-RT-PCR）can amplify PVS, PVX, PLRV and PVA simultaneously, and the fragments were 435 bp （ PVS ）, 625 bp （ PVX ）, 222 bp （ PLRV ）, 300 bp （ PVA ）.The results showed that it was a specific ,sensitive detecting method and quicker, simpler.It provided an effective method of the detection for potato virus.
