水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2012年
1期
35-40
,共6页
草鱼%IgM%IgZ%IgD,表达%抗体
草魚%IgM%IgZ%IgD,錶達%抗體
초어%IgM%IgZ%IgD,표체%항체
根据已报道的草鱼免疫球蛋白IgM、IgZ和IgD的序列设计表达引物进行PCR扩增,将扩增片段克隆至表达载体pET-32a,并在大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)中进行诱导表达.利用亲和层析法纯化表达的重组蛋白,然后免疫日本大耳白兔,获得兔抗IgM、IgZ和IgD的抗血清.经免疫印迹检测,表明IgM、IgZ和IgD的表达产物能够被兔多克隆抗体特异性识别.应用兔抗草鱼IgM和IgZ的多克隆抗体,对草鱼多种器官、组织提取的总蛋白进行免疫印迹检测,在肠、头肾、中肾、皮肤、脾脏、脑、鳃和血液中都检测到IgM和IgZ的表达.
根據已報道的草魚免疫毬蛋白IgM、IgZ和IgD的序列設計錶達引物進行PCR擴增,將擴增片段剋隆至錶達載體pET-32a,併在大腸桿菌Rosetta-gami (DE3)中進行誘導錶達.利用親和層析法純化錶達的重組蛋白,然後免疫日本大耳白兔,穫得兔抗IgM、IgZ和IgD的抗血清.經免疫印跡檢測,錶明IgM、IgZ和IgD的錶達產物能夠被兔多剋隆抗體特異性識彆.應用兔抗草魚IgM和IgZ的多剋隆抗體,對草魚多種器官、組織提取的總蛋白進行免疫印跡檢測,在腸、頭腎、中腎、皮膚、脾髒、腦、鰓和血液中都檢測到IgM和IgZ的錶達.
근거이보도적초어면역구단백IgM、IgZ화IgD적서렬설계표체인물진행PCR확증,장확증편단극륭지표체재체pET-32a,병재대장간균Rosetta-gami (DE3)중진행유도표체.이용친화층석법순화표체적중조단백,연후면역일본대이백토,획득토항IgM、IgZ화IgD적항혈청.경면역인적검측,표명IgM、IgZ화IgD적표체산물능구피토다극륭항체특이성식별.응용토항초어IgM화IgZ적다극륭항체,대초어다충기관、조직제취적총단백진행면역인적검측,재장、두신、중신、피부、비장、뇌、새화혈액중도검측도IgM화IgZ적표체.
